文档介绍：自体口腔黏膜上皮细胞培养眼表重建的实验研究摘要目的:将自体培养的口腔黏膜上皮植片移植于重度碱烧伤后角膜缘功能完全缺损的动物眼表,分期观察上皮恢复情况及其新生血管的生长情况,为该组织工程重建眼表的方法早日投入临床使用提供可靠的实验基础。方法:取6月龄健康家白兔54只,体重(+--)kg,对所有家兔行单眼烧伤, 制备重度碱烧伤模型.,然后随机分为A、B、C三组,每组18只,雌雄不拘。A组为对照组不行移植;B组为单纯羊膜移植组;C组为自体培养的口腔黏膜细胞移植组。术后每日在裂隙灯下观察角膜上皮染色、角膜混浊度以及新生血管生长情况并进行评分;并利用图像分析系统测定角膜新生血管(corneal V)长度,V面积; 每组在术后1w、2w、4w分别随机处死6只家兔,摘取角膜作病理切片,HE染色观察角膜各层结构,利用Image pro ;免疫荧光法检测血管内皮细胞生长因子(vascular endothel ial factor。VEGF)表达;利用印迹细胞技术观察角膜上皮重建情况。结果: 自体体外培养的兔口腔黏膜细胞可在角膜基质上继续增殖、分化为密集的上皮细胞层;移植后1、2、4w各个时间点分别比较三组角膜上皮染色、混浊度以及新生血管生长情况并进行评分,A、B两组间比较差异均无统计学意义(P值分别为:、、 ),A组与C组比较,B组与C组比较差异均有统计学意义(P<)。移植术后第 V面积及血管计数,A组B组比较差异没有统计学意义(面积P=、血管计数P=),A组与C组比较,B组与C组比较差异均有统计学意义(P<)。移植术后第1w对VEGF的表达进行比较,三组间两两比较差异均有统计学意义(P<)。其中 C组(口腔黏膜上皮细胞移植组)V面积最小,微血管计数最少、VEGF 阳性表达量最少。印迹细胞检查:A、B组角膜上皮均发现杯状细胞,C组角膜上皮未发现杯状细胞。结论: ,利用体外培养的自体口腔黏膜上皮细胞进行移植,口腔黏膜上皮细胞可在角膜基质微环境下分化为角膜上皮样细胞,恢复其角膜上皮结构的完整性。 ,维持了角膜缘的细胞屏障功能,减少角膜新生血管的形成,。 ,其抑制新生血管的作用优于单纯羊膜移植抑制新生血管的作用。关键词:体外培养口腔黏膜上皮自体移植碱烧伤角膜新生血管眼表重建山西医科大学硕士学位论文 Reconstruct ocular surface by using autologous cultivated mucosal epithelial Abstract Objective: Animal ocular surface was destroyed by sever alkaliwhich lead tocorneal limbalstem autologous cultivated mucosal epithelial sheet on the animal ocular surface to observe the situation of epithelial recovering and corneal neovascularization,to supply areliableexperiment foundation forthistissue engineering way ofocular surface reconstruction put intoclinicalpractice early. Methods:54 rabbits which 6months old,(-)kg were chosen tomake models of singleeye burned by severecorneal alkaliand divided them intothreegroups,1 8rabbitsfor each group:group A(control group withouttransplantation),group B(amniotic membrane(AM) transplantedgroup),group C(autologous cultivated mucosal epithelialtransplanted group). Therapeutical effectwas evaluated by thetotalscoring eal fluorescence staining,co