文档介绍：第 19 卷第 1 期 1995 年 3 月水产学报 J )U ( R N A I ) ( FF H R IS E IESO F C HN I A V l 19 M h N 1 1995 三角帆蚌瘟病的组织病理研究邵健忠项黎新李亚南(杭州大学生物研究所张明洲毛树坚 3 10 012) 提要对健康及患瘟病三角帆蚌的 13种脏器组织作了系统的形态结构观察和组织化学分析结果表明三角帆蚌瘟病的组织病理变化主要集中在病蚌的肝脏胃和直肠等组织病毒侵袭蚌体后肝脏的吸收细胞未成熟细胞以及胃直肠的纤毛上皮细胞内出现病毒包涵体 DNA和 R NA等正常代谢受到抑制 A KP和 AC P酶的活性和分布发生异常细胞内消化作用受阻最后病变细胞解体导致肝脏胃和直肠等的广泛受损病蚌因消化系统坏死和消化功能丧失而死亡还就正常三角帆蚌消化系统的结构与功能作了探讨关键词三角帆蚌瘟病嵌砂样病毒贝类组织病理三角帆蚌三角帆蚌(场 iroP i m动 g“ L )瘟病是目前我国贝类养殖和育珠生产中危害最为严重的传染性蚌病国内自70年代末开始其病原的研究倪达书等[ 1 982]曾报道该病是由斑点气单胞菌的一个变种所引起张治国等[ 198 6」和沈志荣等「 198 6] 确认为病毒性蚌病 198 7年分离到病原病毒经理化性质等初步鉴别认为具有嵌砂样病毒( A vi )的特征暂定名为三角帆蚌瘟病病毒(yH iop i m i gii pl g v i HPv)[ 张治国等 195 7] 最近邵健忠等[ 1 99a3 1993 b****报道了 HPv的精细结构与基因组及多肤的研究并发现瘟病的性质与消化系统代谢紊乱有关为了进一步探讨三角帆蚌瘟病的发病机理本文报道其组织病理研究结果材料与方法健康蚌 2一 3龄健康三角帆蚌 100余只取自浙江省德清县水产养殖公司蚌养殖基地蚌体长 10 一 1 7 m实验前置水族箱 2 5C人工饲养 30 天以上经检查确证无病后供作对照和人工感染试验用自然发病蚌取自德清地区疫点已植片或未植片的 2一 3龄发病育珠蚌濒死前解剖观察确认具有典型瘟病症状后取样收稿日期 199 11 0 水产学报 19 卷人工感染病蚌按邵健忠等[ 1 993] 报道的蔗糖密度梯度离心法从自然发病的病蚌组织分离三角帆蚌瘟病病毒( HPV ) 然后采用 R d M h法测定其对蚌体的半数致死剂量 I D 并以 l ooID 的量从斧足与内脏团交接处注射健康蚌感染后维持水温25 C在发病早期及后期显症后分别取样病理组织切片法选用自然发病和人工感染发病的病蚌各 7只健康对照蚌 4只分别取小块外套膜生殖腺鳃心室心房闭壳肌斧足肾食道胃肝脏肠道和直肠等 13种脏器组织用eZ ke 氏液固定按常规法制成 5一 6 拼m厚的石蜡切片苏木精一伊红( H E )染色iNko 万能显微镜观察并照相 5 组织化学法以上健康蚌和病蚌的 13种脏器组织分别用冷***或 Z k 氏液固定石蜡包埋切片 Gm i氏钙一钻法显示碱性磷酸酶( AKP)「 B f t等 1982郑德崇等 198 6] M D dl 氏改良法显示酸性磷酸酶(A C)P 「 Cul hgn 1963] Mnn 氏伊红一***蓝染色法显示病毒包涵体***一滨酚蓝(H gBPB)染色法和蛋白酶消化法显示酶原和蛋白质颗粒过碘酸一 Shiff试剂( pAS)反应和糖昔酶消化法显示