文档介绍：生物选修三知识点
专题一基因工程
一、基因工程的概念及基本工具
1、概念：
操作环境：体外
操作水平：
原理：
优点：定向改造生物性状
2、基因工程的基本工具
（1）“分子手术刀”：
1）来源：主要是从生物中分离纯化出来的。
2）功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的断开，因此具有专一性。
3）结果：经限制酶切割产生的DN***段末端通常有两种形式：
2.“分子缝合针”——DNA连接酶
常用类型
E·coliDNA连接酶
T4-DNA连接酶
来源

T4噬菌体
功能
连接黏性末端
连接
结果
缝合被限制酶切开的两个核苷酸之间的
3.“分子运输车”——载体
（1）载体具备的条件：①能在受体细胞中复制并稳定保存。
②具有一至多个限制酶切点，供外源DN***段插入。
③具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。
（2）最常用的载体是
它是一种裸露的、结构简单的、独立于之外，并具有能力的双链环状DNA分子。
（3）其它载体：噬菌体的衍生物、等
二、基因工程的基本操作程序
（一）、目的基因的获取
：编码蛋白质的结构基因。
：从基因组文库中获取、利用扩增目的基因、利用人工合成。
人工合成目的基因的常用方法有反转录法和化学合成法。

（1）原理：
（2）过程：
第一步：加热至90～95℃DNA解链；
第二步：冷却到55～60℃，引物结合到互补DNA链；
第三步：加热至70～75℃，热稳定DNA聚合酶从引物起始互补链的合成。
（二）、基因表达载体的构建
：使目的基因在受体细胞中，并且可以遗传至下一代，使目的基因能够和发挥作用。
：目的基因、、、等
（1）启动子：是一段有特殊结构的DN***段，位于基因的，是识别和结合的部位，能驱动基因转录出mRNA，最终获得所需的蛋白质。
（2）终止子：也是一段有特殊结构的DN***段，位于基因的。
（3）标记基因的作用：是为了受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细
胞出来。常用的标记基因是抗生素基因。
（三）、将目的基因导入受体细胞
：
是目的基因内，并且在受体细胞内维持的过程。
：
将目的基因导入植物细胞：、基因枪法、花粉管通道法等。
将目的基因导入动物细胞：，受体细胞多是。
将目的基因导入微生物细胞：先用处理细胞，使其成为，再将重组表达载体DNA分子溶于缓冲液中与感受态细胞混合，在一定的温度下促进感受态细胞吸收DNA分子，完成转化过程。
原核生物作为受体细胞的原因是：
（四）、目的基因的检测和表达
1、检测：分子水平
检测是否有目的基因：DNA分子杂交技术
（ +转基因生物）
检测目的基因是否转录：分子杂交技术
（DNA探针+转基因生物）
检测目的基因是否翻译：
2、鉴定：个体水平。如转基因抗虫植物是否出现抗虫性状。
三、基因工程的应用
：培育抗虫、抗病、抗逆转基因植物，利用转基因改良植物的品质。
：提高动物生长速度、改善畜产品品质、用转基因动物生产药物，用转基因动物作
的供体
：把导入病人体内，使该基因表达产物发挥作用，从而治