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补体溶血反应.doc

上传人:tmm958758 2016/6/10 文件大小:0 KB

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补体溶血反应.doc

文档介绍

文档介绍:补体溶血反应(1) 取小试管 4支,按下表加入各物将上述各试管充分摇匀后,放37℃水浴箱内15—30分钟观察有无溶血现象。(2) 若红细胞溶解,则液体呈红色透明,为溶血反应阳性,以“十”表示; 若红细胞不溶解,则液体仍呈均匀混浊或有少量红细胞沉于管底,为溶血反应阴性,以“一”表示。溶血反应和补体结合试验 2009-05-24 14:15:36 相关论文相关书籍 Tags : ,所生成的抗原抗体复合物能从溶液中将补体吸着此即谓补体结合。参与补体结合反应的抗原是透明的溶液,故补体结合现象不能被肉眼看出来, 因此必须借助溶血系统( 溶血素及相对应的羊血球) 作为指示剂, 来判定媒质中有无游离的补体, 近而推定媒质中未知抗原( 或抗体) 和已知抗体( 或抗原) 是否进行了特异性的结合。本反应具有很高的敏感性及特异性, 因之常应用于传染病的诊断, 特别诊断病毒疾病和梅毒。由于参与本反应的各种成分间有着一定量的关系,因此在作本试验之前,必须通过一系列的预备实验来确定各成分的使用量,故本反应的实验方法较为复杂。本次实验以伤寒杆菌免疫血清与其相对应的抗原补体结合试验为例。材料: 管号 2 %绵羊 RB C (m1) 溶血素(m1) 补体(ml) (ml) 10. 250. 25- 20. 25-0. 25 30. 250. 250. 25 40. 25--0. 75 1. 抗原:伤寒的抽出液 2. 抗体:伤寒杆菌的免疫血清 3. 补体:豚鼠血清 4. 溶血素:抗绵羊血细胞的兔血清 5. 2% 绵羊红血球 6. 小试管、试管架、水浴锅。方法: (一)预备试验(示教说明) 预备试验包括溶血素效价的滴定,补体效价的滴定,抗原效价的滴定及被检血清的处理。(1) 溶血素效价的滴定按照下表加入各物管号溶血素( ml ) 溶血素稀释倍数 1: 20 补体?( ml ) 生理盐水?( ml ) 2% 羊血球( ml) 假定结果 1 1: 300 37?℃水浴一小时全溶解 2 1: 500 全溶解 3 1: 800 全溶解 4 1: 1000 全溶解 5 1: 1200 全溶解 6 1: 1600 全溶解 7 1: 2000 全溶解 8 1: 2400 全溶解 9 1: 3200 全溶解 10 1: 4000 11 1: 4800 12 1: 6000 对照 1 凡最高稀释度的溶血素可呈现完全溶血者为一个单位。依上表结果第 10管(即1: 400 0 倍稀释) 毫升溶血素为一个单位,在溶血反应中常用 毫升中含有 2 个溶血素单位的溶液,所以试验时应取 1: 2000 倍稀释的溶液。(2) 补体单位滴定依下表加入各试剂: 管号补体(1: 20