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蜂胶预防根面龋作用的实验的分析研究.pdf

上传人:ds6573 2016/6/10 文件大小:0 KB

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蜂胶预防根面龋作用的实验的分析研究.pdf

文档介绍

文档介绍:中文摘要蜂胶预防根面龋作用的实验研究摘要目的:根面龋是老年人的口腔常见病,老年患龋率为 %,%,且根面龋多于冠面龋。患龋老年人群中只有30%接受治疗,70%未接受治疗。因此,根龋病是老年口腔疾病防治的重要内容之一。在菌斑细菌的作用下,牙骨质表层下无机物脱矿,有机物分解,牙骨质结构和完整性遭到破坏软化成根龋。关于根面龋致病菌的观点至今仍有分歧。对致龋微生物生物学特性的研究结果,提示变形链球菌是最重要的致龋菌,对根面龋的发生起协同作用。早期采用的抗生素、***化物防龋等在临床应用上有诸多局限性,尚需要探讨一些新的有效的预防方法。蜂胶成分非常复杂。其中, 以黄***类的含量最高,也是蜂胶的精华所在,约占萃取物的 40%.50%。入们发现它具有多种药理活性,包括抗氧化活性、抗炎、抗病毒、免疫调节以及抗肿瘤作用。目前蜂胶在治疗口腔粘膜病、防治牙周病中效果明显。蜂胶失活牙髓、消毒牙根管对口腔软硬组织无任何副作用。亦可用于皮肤科、妇科、消化内科等多种疾病的治疗中,适用范围广泛。本文将探讨蜂胶防龋效果及其可能的防龋机制,为蜂胶在预防根面龋临床应用提供实验基础。方法:1茵悬液的制备:将复苏48h的变形链球菌种于羊血培养基微需氧条件下3712恒温箱培养24h。挑选菌落, 传代培养3次,涂片检查细菌生长良好,确定为变形链球菌后将细菌转种于牛心汤培养液中。微需氧环境37"(2恒温培养中文摘要 24小时。使用紫外分光光度计用无菌生理盐水调整为OD= 的菌悬液用于实验。 2蜂胶醇溶液(propolis’S solution简称:P’s)的制各: 将1009/L醇溶性北京蜂胶提取物按1:2的梯度逐级成倍稀释, ,,---种浓度蜂胶醇溶液。 3体外抑菌实验:采用纸片琼脂扩散法,使用卡尺测量每组试剂周围抑菌环大小。每个试剂组作5份标本。 4收集因牙周病导致的ⅡI度松动磨牙40颗,体视显微镜下观察(放大10倍)无裂痕缺隙,无根面龋坏,刮除牙结石及根面牙周膜。, 干燥,置10%甲醛溶液中消毒4"C冰箱保存备用。所有牙用金刚砂盘从中央窝处沿颊舌向面纵向剖开,以牙冠近(远)中侧作为试验区。从釉牙骨质界下lmm带lJ成7mmx7mm的牙骨质块,去离子水超声清洗12rain,吹干试验区中部暴露形成 5mmx5mm的实验开窗区。其余部位涂布指甲油。将预备好的牙骨质块随机分成5组(每组15个标本)。开窗区分别用 ,,***化钠溶液,去离子水(deionizedwater简称D’w)浸泡约5min, 自然凉放30min后,放回37℃人工唾液恒温水浴,每天3次, 每组各于5d、10d、15d随机取出5个标本去离子水冲洗处理 4min室温下干燥。 P’s,’s, P’s, 209/LNaF,D’w处理过的牙标本分别悬吊上述菌液2ml中在微需氧条件下培养48h后取出,脱矿液留作原子吸收分光光度计测ca2+溶出量。 5扫描电子显微镜观察:用高速金刚砂盘喷水条件下将脱矿15d后, P’S处理过的牙标本每个样本于开窗中分中文摘要切成两半,%戊二醛内预固定24h, l%锇酸内后固定2h。用PBS缓冲液漂洗,50%至无水乙醇逐级脱水干燥后镀金膜,扫描电镜观察标本并拍照。 6光镜观察:将剩余脱矿牙标本以4%多聚甲醛溶液固定 24h,10%EDTA溶液常规脱钙,以平行牙体长轴为标准做近远中向连续组织切片,行FIE染色,观察标本并拍照。结果:(1)随蜂胶浓度降低,抑菌环直径变小。 P’s 组, P’-a:,-i-。。仍有明显抑菌环,与95%乙醇组 -1--。(2)脱矿和钙溶出量测定结果:蜂胶醇各浓度组均有抑制牙骨质脱矿的作用。作用5天的各浓度组与D’W组相比,牙骨质Ca2+溶出量差异均具有高度显著性(P<),且随着蜂胶浓度的增加脱矿量也随之减少。与***化钠组相比, P’s组牙骨质C0抖溶出量无显著性差异(P>)外,其余各实验组的脱矿作用差异均具有高度显著性(P<)。作用10天各浓度组与 D’W组相比,牙骨质脱矿量差异均具有显著性(P<),且随着蜂胶浓度的增加脱矿量也随之减少。与***化钠组相比, ’s组脱矿量差异有显著性(P<)外,其余各组对牙骨质的脱矿作用差异均具有高度显著性(P<)。作用15天的各浓