文档介绍：辽宁师范大学
硕士学位论文
葡萄PR基因启动子活性分析及ERF对PR基因表达的调控
姓名:刘纪元
申请学位级别:硕士
专业:遗传学
指导教师:侯和胜
2012-05
摘要植物在生长发育过程中会受到包括生物胁迫和非生物胁迫在内的各种逆境胁迫,它们严重影响了植物的生长发育及产量。研究表明:当植物受到胁迫后,体内的许多抗逆相关基因会受到上游转录因子的调控,抵抗外界的胁迫,起到自我防御的作用,可见,抗逆相关基因在植物胁迫反应中发挥着重要的作用,因此研究抗逆相关基因调控的分子机制十分必要。病程相关蛋白蚴侵参锟鼓嫦喙鼗虻囊恢郑狙芯恳云咸盐6象,克隆得到蚱舳樱云渌呈阶饔迷<辛朔治觯⒀芯苛怂呈阶饔迷<与乙烯响应因子涞南嗷プ饔霉叵担〉萌缦陆峁肞扩增技术获得长度为的欧洲葡萄〕滔喙氐鞍谆钠舳有蛄校治龇⑾执诵蛄兄泻卸嘀钟敫骼嘀参锛に叵煊ο喙氐乃呈阶饔元件,、甧、,。菇段长度不等的缺失片段的表达载体。瓹榈挤ń个重组表达载体转染拟南芥原生质体细胞并检测报告基因达量。结果显示随着笔纬ざ鹊脑黾樱ǜ婊虻谋泶锪砍氏陆登魇疲得髟诿段笔沃卸己卸韵掠位虮泶锲鸬揭种谱饔玫乃呈阶饔迷<笛槭乙丫菇ê玫腣蚔转录因子表达载体分别与鲋刈榈娜笔片段表达载体进行双质粒转染拟南芥原生质体细胞,并检测报告基因谋泶锪俊结果发现:转录因子增强了蚱舳’缺失片段的转录活性,对基因启动子具有转录激活作用;B家蜃蛹跞趿薞基因启动子笔段的转录活性,对蚱舳泳哂凶B家种谱饔谩综上,本研究初步明确了确,蚱舳又兴呈阶饔迷<闹掷唷⑻匦裕捌溆乙烯响应因子涞南嗷プ饔霉叵担=徊窖芯坎〕滔喙氐鞍椎骺氐姆肿踊提供了理论基础,为高抗性植株的培育提供理论参考。关键词:葡萄;启动子;顺式作用元件;转录因子;瞬时表达辽宁师范大学硕士学位论文笙寸
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植物病程相关蛋白研究进展葡萄,由于具有较高的营养价值和经济价值,已经成为世界上最常见、最受欢迎的水果之一。目前世界上存在许多葡萄的栽培品种,但是大部分对于不良环境的适应和抵抗能力都较差,包括生物胁迫和非生物胁迫在内的各种逆境的胁迫成为了影响其正常生长发育和地域分布的重要因素。,虽然其抵抗病虫害及不利环境的能力比较强,但可食性却不如栽培品种。因此在当今环境问题愈发突出、需求量持续增长的大环境下,培育出兼具较强抵御能力和较理想可食性的葡萄品种已经成为了一种迫切的需求。所以研究葡萄抗逆相关基因的分子作用机制,对于提高葡萄抗性、培育高产优质葡萄新品种有着非常重要的意义。近年来,植物在抗逆性机理方面的研究以分子生物学水平上进行的最为活跃,研究表明:植物在受到逆境胁迫时,体内许多基因能够进行诱导表达以适应这种胁迫【俊;因表达产物可分为两类:一类是功能蛋白,比如毒性降解酶、渗透调节因子合成酶等,它们的作用是保护机体在逆境条件下免受伤害以维持细胞各种正常的代谢活动;另一类是蛋白酶、蛋白激酶和转录因子等【,它们的作用是在信号感应及传递过程中参与调控。在植物逆境胁迫应答过程中,环境的变化首先引起了植物的感应,植物会把通过多种途径获得的感应,即所谓的外部信号转变为细胞内部信号,传送至细胞核,细胞核中的转录因子会与抗性相关基因启动子上的顺式作用元件产生相互的作用,使得抗逆基因得到表达,以达到植物自我防御的目的。可见,转录因子与基因启动子之间的相互作用是植物抵抗逆境胁迫的关键,抗逆相关基因在植物防御胁迫反应中发挥重要的调控作用。因此,利用植物自身的抗性相关基因来改良植物品种、提高植物的综合抗性是十分可行的。病程相关蛋畆,疨钤缡窃辏蒝等人从烟草中发现的,他们发现在过敏反应的条件下,用多聚腺苷酸诱导烟草,组织中出现新的可溶性蛋白质,经过电泳检测发现,这些蛋白在图谱上的条带会呈现出不同的迁移率,将其命名为病程相关蛋白【。当时对其定义为由基因编码,只有在病理或病理相关环境下才能诱导产生的一类蛋白质,命名顺序则是以其在聚丙烯酰胺凝胶电泳中的泳动率大小为依据【。年月日,第二次植物刑只嵩谖靼嘌勒倏#会上对病程相关蛋白的定义做了补充,在基本保留原定义的基础上对“病理或病理相关环境”做了更加精确的解释:指胁迫环境或逆境,比如病原物侵染、化学制剂作用等【。辽宁师范大学硕士研究生学位论文
当植物体衰老时,也会产生一些相关的蛋白,由于它们的出现常常伴随着对病原的反应,因此它们也被称为病程相关蛋白【.参锊〕滔喙氐鞍椎纳锾匦院头掷植物病程相关蛋白相对分子质量较小,一般为.,单体,稳定性较强,