文档介绍：浙江大学
硕士学位论文
大豆、榨菜的组织培养及遗传转化研究
姓名:胡小祥
申请学位级别:硕士
专业:蔬菜学
指导教师:郭得平

既不能分化愈伤,也不能分化芽。√摘要/素组合诱导子叶、真卅再生不定芽试验。,诱导活性大小本论文研究了大豆的离体再生和根癌农杆菌介导的遗传转化及榨菜的离体培养。大豆子叶、下胚轴培养在不同激素的培养基中,只能诱导出愈伤组织,难分化芽。但子叶节却能诱导出丛生芽,在以榨菜子叶、、、蚄认赴至阉睾蜕为,、、蚄盏甲右恫欢ㄑ吭偕淖罴雅ǘ确直鹞、、,下胚轴只分化愈伤组织,少数分化出绿色芽点,根系最差,通过从重组质粒上切下连同舳片段,将该片段定向克隆到柿5亩嗫寺∥坏鉎、【。经双酶切鉴定证实蚩寺〉〉既敫┡└司,获得了含重组质粒的根癌农杆菌菌株。通过根癌农杆菌介导对传染性支气管炎病毒纤突蛋白蛟诖蠖怪械囊糯;辛搜芯俊以子叶节为外植体,在抗性筛选培养基上大多白化死亡,有少数生长出芽,转化频率最高为关键词:大豆;根癌农杆菌:遗传转化:植株再生:榨菜、腂嘌显偕德蚀%。蜭。作用,以ァ6宰右丁⒄嬉丁下胚轴、根系四种外植体在附加蜭蚻蜭、,,/.,疞
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前言大豆是世界上最重要的农作物之一,富含蛋白质和植物油。近年来国内外学者对大豆离体培养及遗传转化有许多研究,培育出了含不同目的基因的转基因品种,这些基因包括转化抗除草剂基因、抗病虫基因、提高大豆品质的基因等。大豆是难再生植物,其再生频率低,而且不同基因型之间的再生能力也存在较大的差异。因此,针对某一大豆品种时,需研究对其高频再生体系有影响的各种因素。利用转基因植物生产疫苗是近几年植物分子生物学家和免疫学家研究的活跃领域之一。转基因植物生产疫苗有其独特的优势,具有生产成本低廉、贮存简单、使用安全、不污染环境、可通过直接食用进行免疫等特点。从长远的观点看,转基因植物疫苗将在未来的疫苗市场和药物市场占重要大豆转基因研究的报道较多,但利用大豆高蛋白含量的特性将病毒基因导入大豆,生产植物疫苗还没有报道。本试验利甩根癌农杆菌榈挤ńù拘灾苎撞《虻既氪蠖菇醒芯浚芯拷峁唤鑫@米;虼蠖股萦靡呙缣峁┘际跬揪丁⒁捕栽谄它植物进行类似研究具有参考意义。尤其在抗击‘非典’的今天,为大规模生产及应用疫苗提供有益的借鉴。榨菜属十字花科芸苔属植物,缺少其组织培养的系统研究。本试验旨在获得一种高再生频率的方法,为进一步进行榨菜遗传转化研究奠定基础。地位。
,诱导产生的多数体细胞胚形态不正常,,,分生率可达一%.程度小,②由于含有生长素统嗝顾逑赴叻⒀,约在余种高等植物上进行了离体培养。豆科植物组培始于年代,迄今至少有属约鲋纸泄体培养,其中属约个种经组培获得再生植株,,种子中含大约%的蛋白质和%:一条是器官发生,另一条是胚胎发生。大豆器官分化与植株再生等首次报道大豆下胚轴在附加~/和甇/赴至阉氐腉和培养基上产生不定芽,,、子叶节趵虻跎5醯妈钡等,刘北东等パ王慧中等,韧庵蔡謇胩迮嘌纬闪送暾男≈仓辏通过幼胚培养,,培养基为,再加上的盏计鞴俜⑸男Ч虾茫糜谂嘌挠着叩氖室顺ざ任—湮⒘吭K厥室说谋数在之间。分化培养时,为控制愈伤组织的生长速度可加八/,组织学研究表明这些体细胞胚都不具合子胚所具有的顶端分生组织,但当转移到元激素的培养基上时,,如何进一步高频率,同步化诱导体细胞胚产生和调节体细胞胚正常生长、·陡速萌发和高频再生植株,①⒀浚嘌儆捎谡崽桥ǘ鹊停秆剐。逑赴