文档介绍：:龚金兰指导教师:汪森明背景:摘要近些年来,叶酸分子靶向的药物研究方兴未艾,伴随着纳米生物技术在医功能复合纳米粒子,其结构包括载体叻肿踊衔、活性成分瘟埔┪、靶向分子、聚乙二醇投哉粘上窦恋刃奘纬煞帧6喙δ芨春夏擅琢?朔硕士学位论文恶性肿瘤是危害人类身体健康的重大疾病,传统的抗肿瘤药物在杀死肿瘤细胞的同时不可避免地杀死正常细胞,从而引起常见的不良反应及化疗反应率低。因此提高抗肿瘤药物的靶向性和安全性成为现今肿瘤治疗的新热点,也就是说,寻找肿瘤恶性转化的关键“标靶”,并研究相应的靶向药物已成为目前肿瘤药物治疗研究的重要方向。二十世纪八十年代初期,大量研究结果表明,肿瘤细胞表面高表达叶酸受体,尤其体内叶酸缺乏时;而正常细胞表面很少过表达叶酸受体。同时,美国得克萨斯州西南医学中心的确⑾钟卫胍端赏ü端受体介导的胞吞作用进入细胞。等发现叶酸偶联物与游离叶酸一样也可通过叶酸受体介导的胞吞作用进入细胞。这些发现使叶酸成为肿瘤靶向治疗的可能“标靶”。药学领域的运用,叶酸这一靶向分子已成功的与纳米技术相结合。叶酸主动靶向纳米载体复合物的研究已由传统的纳米粒子砻嫖淳奘逐渐转化为多传统纳米粒在体内大部分迅速被网状内皮系统淌桑延诘酱锲渌琢
组织的缺点,从而延长在体内循环的时间,通过肿瘤靶向治疗机制——增强的渗透性和保留效应,完成对肿瘤组织的靶向作用。利用纳米技术进行恶性肿瘤早期诊断和治疗是目前生物技术领域中最前沿的研究课题,纳米生物技术将成为继放疗、化疗和手术治疗后治疗肿瘤的更有效办法。本项研究选用中等分子量壳聚糖魑D擅自靥澹忍教忠端嵋豢蔷糖偶联物的制备、纯化及鉴定。通过离子凝胶法制备纳米级微球,并研究其生物学特征。最后利用人子宫颈癌细胞株与叶酸靶向性纳米药物共培养,研究叶酸靶向性药物在高表达叶酸受体肿瘤细胞的实验应用前景。第一部分壳聚糖纳米微球的制备及体外释放性能目的:优化试验条件,制备合适的壳聚糖纳米微球/⒏涸厣献仙即芯扛涸刈仙即嫉目蔷厶俏⑶狿/逋馐鸵┬阅堋7椒ǎ翰捎离子凝聚法和透析法制备疦癈/,激光粒度分析仪测定微球粒径大小和分布,透射电镜观测微球形态学特征,并在磷酸盐缓冲液,中对疦刑逋馐鸵┭芯俊=峁褐票窩/的最佳条件是壳聚糖与多聚磷酸钠读勘仍:间。制备的疦翁嬖蚓剩无粘连,=崧郏鹤仙即伎蔷厶俏⑶蛐阅芰己茫票腹ひ占虻ィ型晌@第二部分叶酸一壳聚糖纳米微球的制备目的:探索叶酸偶联的壳聚糖纳米微球,/暮铣煞椒ā7椒ǎ豪靡端峄钚怎ビ肟蔷厶欠肿上的氨基反应形成稳定的酰胺键,合成偶联物。再利用壳聚糖在偏酸性溶液中带正电荷,在高速磁力搅拌作用下能与阴离子凝集的特性,以紫杉醇为模型药物,制备负载端崤剂?蔷厶悄擅孜⑶—狿/Mü中文摘要,┝%,在诶刍鸵想的紫杉醇缓释系统。
第三部分叶酸一壳聚糖一紫杉醇微球体外实验研究目的:探讨叶酸一壳聚糖纳米微球的靶向性。方法:用异硫氰酸荧光素外分光光度法测定叶酸及紫杉醇的含量。结果:由、狢红外图谱对比可知,成功地将叶酸与壳聚糖偶联。所制备的—狿/,形态均质规则,无粘连,平均粒径饴%,载药量%。结论:成功制备叶酸偶联壳聚糖纳米微球。标记的叶酸一壳聚糖纳米微球疦及普通壳聚糖纳米微球/与人宫颈细胞在无培养基中共培养,用荧光显微镜观测细胞对叶酸一壳聚聚微球与壳聚糖微球的摄取差异,及在无培养基中添加游离叶酸后,细胞摄取情况的改变。通过ú舛ê嗤恳┪镒仙即嫉脑匾┮端嵋壳聚糖微球狢/⒃匾┛蔷厶俏⑶疦及单药紫杉醇对细胞生长的不同抑制率。结果:荧光显微镜观测结果表明细胞对~疦纳闳「哂谄胀–/。在无培养基中添加游离叶酸后,细胞对/的摄取相对减少,而普通疦蛭廾飨员浠结果显示—疦榈闹琢鱿赴种坡示灾哂谄胀–/组。结论:叶酸一壳聚糖纳米微球能通过细胞膜上叶酸受体介导内吞入胞,其负载紫杉醇药物纳米微球能特异性抑制高表达叶酸受体肿瘤细胞的生长。硕士学位论文关键词:叶酸偶联壳聚糖纳米粒紫杉醇微球药物载体
⋯⋯,:甌:,琣琤瑆硕士学位论文,疭.:甌琤,.琫琲疭,琱瓼甃一』●』●··●
.、析琣琣,..—.、析甒疦甅狿/,.琾瑂琹琤,,.疦
.../甅甌—疦%瑀甊.,%瑃,,./.、Ⅳ痩琩—
:籔籑;甅..,,—甌甌..
中英文缩略词对照表硕士学位论文
导师签名:巩日期:沙艿年多月岁日⒈C芸冢谝荒杲饷芎笫视帽臼谌ㄊ椤南方医科大学学位论文原创性声明作者签名:蕉盈芝日期:鲥月学位论文版权使用授权书作者签名:摩宝兰日期:阅月本研究已发表与未发表成果的知识产权均归属第一军医大学。据库进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。本人郑重声明:所呈交的论文是本人在导师的指导下独立进行研究所取得的研究成果