文档介绍：气啜寰氕普。转细胞凋亡抑制基因水稻抗纹枯病和烂秧病研究博士学位论文缝塑塑焦直弛盗奎国塑堡型迭昌煎援巫芏擅±缝塑筮王匿麴超茔:量生塑蕉盔堂医研究生:指导申请学位专业所在教师嗉侗名称方向学院±透分类号密级单位代码、号:
摘要为了获得具广谱和持久抗性的水稻新种质,抵抗坏死营养型病原菌诱发的多种病害和生产过程中的多种逆境,本研究利用农杆菌介导转化法首次将来源于昆虫杆状病毒的细胞凋亡抑制基因—蚿导入水稻中。依目的基因编码区序列设计了三对引物,从昆虫表达载体—和一中扩增了细胞凋亡抑制基因蚿。基因的编码区长嗦胍桓鲇个氨基酸组成的,分子量约为哂幸种葡赴蛲龉δ艿牡鞍祝籶基因长为嗦胍桓鲇龅;嶙槌傻模肿恿吭嘉的具有抑制细胞凋亡功能的蛋白。,经觳狻⒚盖屑ê秃塑账嵝蛄胁舛ǖ确治鋈啡瞎菇ㄎ尬蟆利用农杆菌介导转化法通过构建的载体将目的基因和对照基因既刖酒分帧爸花拧薄ⅰ爸谢拧焙汀癆保不竦米;蛩株。经猙和分析,导入的基因已整合到转基因植株的基因组中,并转录了完整的。利用┰鼋峁訪代的外源基因分离进行了遗传分析,结果表明:目的基因在蟹厦德尔分离比例,并与选择标记基因紧密连锁。接种立枯丝核菌⒌鞑樽;蛩镜姆⒉〖侗穑扑闫骄〖都安∏指数。接种天时,提取病斑周围组织的%琼脂糖凝胶电泳,观察细胞凋亡的典型标志位9鄄臁⒓扑慵巴臣品治鼋峁允荆既肓讼赴蛲鲆种苹虻摹爸谢号”4仓昴芄灰种苹邓烙Q筒≡婢秩居辗⒌南赴蛲觯灾靥岣吡耸芴迤分侄缘疚瓶病的抗性。转细胞凋亡抑制基因水稻的代幼苗能够抑制在低温、弱光、短日照等不良环境条件下由立枯丝核菌秩居辗⒌南赴蛲觯灾靥岣吡搜砻绲拇婊盥屎涂估醚聿能力。对含有虻摹癆盩仓攴直鸾又值疚辆那缀托小种昂头乔缀托孕≈,初步研究的结果表明,细胞凋亡抑制基因对稻瘟病的致病性及发病级别没有显著影响。转基因水稻的种子萌发、形态建成、繁殖过程正常,未受到细胞调亡抑制基因的显著影响。关键词:凋亡抑制基因,转基因水稻,稻纹枯病,烂秧病,抗病性
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研究生签名:习粤否时同:埘年月牙目关于论文使用授权的说明独创性声明C艿难宦畚脑诮饷芎笥ψ袷卮诵本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得中国农业大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文留送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅,可以采用影印、缩印或扫描中作了明确的说明并表示了谢意。时间:加哼年绿鹑本人完全了解中国农业大学有关保留、使用学位论文的规定,即:学校有权保等复制手段保存、汇编学位论文。同意中国农业大学可以用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。研究生签名:导师签名时间:知矿年卤蛉
、修饰后,与合适的表达元件及载体进行重组,进而年和岢鯠分子的双螺旋结构模型,奠定了分子生物学的基础。年等建立的重组际酰铱A俗;蜓芯康男蚰弧闦壤门└司转化法获得了首例转基因烟草,开创了植物转基因的新纪元。此后的余年间,随着基因克隆技术、植物组织培养技术、基因导入技术和外源基因分子鉴定技术的不断发展与完善,植物转基因研究得到了迅猛发展。导入植物细胞,并使之稳定整合、表达和遗传的一项生物技术,打破遗传隔离、定向改变遗传性状、缩短育种局期是其有别于传统植物育种的主要特点。多年来中外科技人员已在包括大田作物、蔬菜、水果、花卉、药用植物、树木及牧草在内的多个属,喔鑫镏值闹参镏锌U沽转基因研究:创造了耐除草剂、抗病虫、抗逆、品质改良、生物反应器等具有新性状的转基因植物。其中部分转基因植物已投入大面积生产,如抗虫棉花、耐除草剂大豆、耐贮藏番茄等。水稻是最重要的粮食作物之一,世界上半数以上的人口以稻米为主食。培育高产、优质、抗病、抗逆的水稻新品种,对于解决全球粮食危机、提高人类生活水平具有重大意义,转基因技术为这一目标的实现提供了可能。⒆;椒ǖ姆⒄早期的转化工作大多以原生质体为受体材料而进行的,而在当时原生质体的培养技术不够完善,许多品种的原生质体再生能力很低,如是就大大限制了转化研究的开展。自一世纪年代初基因枪转化法和农杆菌介导转化法在水稻上成功应用以来,这类以原生质体为受体材料而进行的转化方法便很少再用了。作为历史,简短回顾如下:法:且恢执俳侍融合的化学物质,在原生质体与外源基因共培养时加入梢蕴岣咴侍迳闳胪庠