文档介绍：选修 3 《现代生物科技专题》知识点总结专题 1 基因工程基因工程的概念基因工程是指按照人们的愿望, 进行严格的设计, 通过体外 DNA 重组和转基因技术, 赋予生物以新的遗传特性, 创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。基因工程是在 DNA 分子水平上进行设计和施工的, 又叫做 DNA 重组技术。(一)基因工程的基本工具 1.“分子手术刀”——限制性核酸内切酶( 限制酶) (1 )来源:主要是从原核生物中分离纯化出来的。(2 )功能:能够识别双链 DNA 分子的某种特定的核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开,因此具有专一性。(3 )结果:经限制酶切割产生的 DNA 片段末端通常有两种形式:黏性末端和平末端。 2.“分子缝合针”—— DNA 连接酶(1) 两种 DNA 连接酶( E· coli DNA 连接酶和 T 4- DNA 连接酶)的比较: ①相同点:都缝合磷酸二酯键。②区别: E· coli DNA 连接酶来源于大肠杆菌,只能将双链 DNA 片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来; 而T 4 DNA 连接酶能缝合两种末端,但连接平末端的之间的效率较低。(2) 与 DNA 聚合酶作用的异同: ? ? ???????????????????? DNA 聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端,形成磷酸二酯键。 DNA 连接酶是连接两个 DNA 片段的末端,形成磷酸二酯键。 DNA 连接酶 DNA 聚合酶不同点连接的 DNA 双链单链模板不要模板要模板连接的对象 2个 DNA 片段单个脱氧核苷酸加到已存在的单链 DNA 片段上相同点作用实质形成磷酸二酯键化学本质蛋白质 3.“分子运输车”——载体(1 )载体具备的条件: ①能在受体细胞中复制并稳定保存。②具有一至多个限制酶切点,供外源 DNA 片段插入。③具有标记基因,供重组 DNA 的鉴定和选择。(2) 最常用的载体是? ?质粒, 它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌染色体之外, 并具有自我复制能力的双链环状 DNA 分子。(3 )其它载体: λ噬菌体的衍生物、动植物病毒(二) 基因工程的基本操作程序第一步:目的基因的获取 1. 目的基因是指: 编码蛋白质的结构基因。 2. 原核基因采取直接分离获得,真核基因是人工合成。人工合成目的基因的常