文档介绍：浙江大学
硕士学位论文
甘露聚糖结合凝集素的分离纯化和活性研究
姓名:沈杰
申请学位级别:硕士
专业:儿科学
指导教师:尚世强

甘露聚糖结合凝集素的坌盎幽活性研究/N鳯,,又称甘芯勘尘坝肴盏模焊事毒厶墙岷夏摘要研究生:浙江大学研究生院专业:导师:学院:医学院儿科学沈杰尚世强高丁R蚧蛲槐涠贾碌腗表达水平降低或结构异常,与免疫功睦、露糖结合凝集素且恢指评胱右览档血清凝集素,在防御抵抗多种病原微生物的天然免疫中起着重要的作用,对鲈碌岁的婴幼儿尤其重要。且桓鲇扇舾筛鱿嗤难堑ノ蛔槌傻墓丫厶宸肿樱刻蹼牧吹腃端是一凝集素结构域妓衔锸侗鸾峁褂。近耸且唤涸U两个结构区与纳镅Чδ苊芮邢喙亍F淠亟峁褂蚩梢杂肽承┓定的糖配体结合,尤其是与病原微生物表面的糖链结合后,可通过胶原样区激活喙厮堪彼岬鞍酌福せ畈固逑低常馓跬揪冻莆D魍径。部芍苯佑胪淌上赴砻娴慕涸厥芴褰岷希⒒拥骼硗淌晒δ或引起其它的免疫反应。,但在感染的早期可升处于不成熟阶段的儿童对感染的易感性增强密切相关。浙江大学硕士学位论文
峁孩費的分离纯化:羊血清与人血浆分别经亲和层析后,得到纯化的同菌株结合力差异较大。偶联,制成亲和柱基质——、②肿咏涸峁沟募ǎ貉蜓G錗分子被胶原酶消化后。合力;对溶血性葡萄球菌、阴沟肠抒菌、表皮葡萄球菌的结合力相本研究旨在用亲和层折法分离纯化出肿樱⒉舛ㄆ溆氲ヌ桥涮以及与儿童临床上常见细菌的结合括性,探讨其在儿童天然免疫中的作用。方法:将甘露聚糖与溴化氰活化的甘露聚糖。将羊血清或人血浆过亲和拄,在钙离子存在的条件下,肿涌捎胫系母事毒厶墙岷稀S肊ü细评胱樱忧缀柱上洗脱佣掷氪炕鯩。用还原性%测定羊及人肿拥ヌ宓姆肿恿俊Q蜓G錗经胶原酶消化后,将其产物行还原性%狿鄄霱分子量的变化。用酶联凝集素试验测定羊血清氲ヌ桥涮寮坝氤<妇慕岷匣钚浴肿印T诨乖跫滦蠸蜓G錗在和及更高分子量处有蛋白质条带;人血浆处有蛋白质条带;;③羊血清誏与单糖配体的结合活性:羊血清肿佣愿鞯ヌ桥体的结合有一定的选择性,从大到小依次为:;④羊血清氤<妇慕岷匣钚裕貉蜓G錗对不同的细菌有不同的结合力:对解鸟氮酸克雷伯氏菌、大肠埃希氏菌有很强的结对较弱;对肺炎克雷伯氏菌、.流感嗜血杆菌、金黄色葡萄球菌的不结论:用甘露聚糖亲和柱行亲和层析能从哺乳动物血清浙江大学硕士学位论文、/。.
【关键词事毒厶墙岷狭瑁弧蒹憾惶烊籮昔彩糖识别:细菌单糖的结合有不周的选择性,其选择性与人血浆/类似。浆蟹掷氪炕鲇谢钚缘腗分子,人血浆ヌ宓姆肿恿渴,羊血清ヌ逵辛街郑肿恿糠至为和。羊血清肿佑其它哺乳动物的肿右谎簿哂薪涸峁褂颉Q蜓G錗对各种羊血清/对不同的细菌有不同的结合力,对革兰氏阴性菌的结合力相对较阳性菌强。浙江大学硕士学位论文/./,
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前言为一个凝集素结构域妓衔锸侗鸾峁褂颉!猚甘露聚糖结合凝集素,,又称甘露糖结合凝集虻琈遣溉槎锾迥谟筛卧喾置诘囊恢指评子依赖型的型G迥亍K诜烙挚苟嘀植≡⑸锏奶烊幻庖中起着重要的作用,现被认为是宿主非特异免疫中一重要的抗感染免疫因子,,。三条肽链在胶原样区并联缠绕成三螺旋结构,从而形成一个亚单位。这些亚单位通过硕蚣牧咏徊阶樽俺筛咭患兜墓丫厶湫偷挠卸厶濉⑷厶濉⑺木厶搴土厶。有研究表明,7⒒生物学功能,如激活补体等,至少要组装成四聚体【引。胶原样区和荕两个重要的结构区域。砻骐幕飞系氨基酸残基可以和一个钙离子及糖基配体上的个羟基基团结合。此种结合对甘露糖有绝对的选择性,对其它糖如酰氨基葡萄糖、灰阴8事短胺、岩藻糖等也有一定的亲和性。由于每一个胩桥涮逑嗷プ饔玫慕离常数很小为虼薓必须通过几个庇胩桥体相互作用才能获得生物学上有意义的结合。恳桓鲅堑ノ坏娜鎏墙合位点问有一个笥业姆指艟嗬耄纬梢唤岷掀教ǎ乇鹗屎嫌胂妇面重复排列的糖基多点结合,且细菌表面糖链末端含甘露糖和乙酰氨基葡萄糖较常见,因此容易被岷稀2溉槎锬谠葱蕴堑鞍滋橇疵挥邢妇那样有规律的重复排列的糖基结构,末端也很少含甘露糖和乙酰氨基葡萄糖,因此换嵊氩溉槎锉旧淼奶堑鞍捉岷希也溉槎锾堑鞍椎耐液酸化也会影响胫岷细铡素珻末端浙江大学硕士学位论文一