文档介绍：(含量和活性测定) 、干燥、保存及纯度鉴定第二章:生物化学分析的常规方法?生物化学实验的化学过程?生物化学实验的物理过程?实验方法的组合一、生物化学实验设计过程 1、实验的化学过程?几个要求分离试剂与目的物不发生化学反应或相互作用,不改变其属性,保存分子的原独立状态。易使目的物发生存在状态的变化(溶解度、分配系数等)。不易残留,易回收处理,对人体和环境不易造成损害。鉴定试剂与目的物发生化学反应敏感,用量越少越好。与目的物结合专一性越强越好。?几个要求配制提取液所需试剂明确目的物溶解性,确定溶剂。根据目的物用途确定溶剂类型(如用于食品以不含有毒有害成分为准则,用于分析则要专一性好、灵敏度高)。根据所具有的条件及鉴定提取的需要进行确定。提取溶剂的 pH 值利用目的物解离、沉淀物形成及稳定。目的物解离或沉淀中仅有物理性状变化。目的物可溶性好,鉴定时专一性好。对试剂选择总的要求: ,对于鉴定试剂要越纯越好,灵敏度和转移越高越好。 、用量少的试剂。 ,而尽量不产生副反应。 2、实验的物理过程(1)物理过程的特点目的物状态的转变只受物理因素(温度、压力、黏度、溶剂介电常数等)的制约制备性实验物质状态变化影响目的物状态的因素: 目的物分离量分离过程无目的物性质改变鉴定性实验目的物感官的突出性目的物固有本质的显著性目的物属性的明朗化目的物应用性的增强(2)物理过程所需设备的选择制备性实验分析鉴定类实验定性定量兼有类实验选择原则:尽量选择工作效率高、精确度大、分辨率好的设施和器具。综合性实验验证性实验关键:大量收集资料进行方法上的分析、比较,全面了解各方法的优缺点及使用条件等, 形成自己的实验方案, 然后再行选择。依据实验性质选择依据方法的设计选择对实验器具和方法选择的忌讳脱离客观条件不根据所设计实验方案选择器具和设施所选仪器方法贪大求全实验方案设计与专业学科脱轨 3、实验方法的组合实验方法的组合的目的:构成一个实验流程的工作路线,避免盲目。要明确:做什么?用什么材料做?涉及的器具和设施有哪些?工作量有多大?关键工作是什么?难点是什么等? 制备性实验的流程: 材料选择→破碎匀浆→固液分离→初步纯化→精制→浓缩干燥→产物实质:目的物的转移过程。主线:保持目的物被独立转移的状态(保持良好的活性)。条件控制和设施操作处于中心位置,要求各步骤衔接紧密,间歇短,一气呵成。分析鉴定性实验的流程: 目的物抽样溶解→溶液→样品显色→成分测定→换算→分析数据关键:显色反应。要求显色反应灵敏、精确、稳定,重复性好。该类实验的多环节设计组合越简化越好,时间越快越精确。生物化学实验过程的设计 1、对分离制备性实验,尽量做到目的物回收率、纯度、活性均较高; 2、整个过程参与环节的组合越紧凑越好,活性和目的物流失越少越好; 3、设备和试剂的选择要根据目的物的要求确定用量以减少消耗; 4、整个流程要有可操作性,同一操作方法,尽量避免重复使用。二、生物化学分析方法?重量法?化学法?分光光度法(比色分析法) ?酶法?色谱法生物化学分析的目的:测定一定供试样本中某类或某种生化物质的含量或活性。 :通过一定的方法和程序,从供试样本中提取、纯化出某一类或某一种成分,求出其在样本中所占比例的分析法。常用重量法分析的生物物质:水分、灰分、粗脂肪、纤维素等。例:油料作物种子粗脂肪的含量的测定选取具代表性的种子,去杂质,按四分法缩减取样。然后按国家标准( GB )制样、取样、抽提、干燥、称重、计算含量。