文档介绍：华中农业大学
硕士学位论文
腐胺对棉铃虫生长发育的影响及ODC基因片段的克隆
姓名:李慧
申请学位级别:硕士
专业:农业昆虫与害虫防治
指导教师:王满囷;张国安
20080601
要摘范悦蘖宄嫔し⒂挠跋多胺琍女腐胺琾⒀蔷ò,及精胺瑂且焕啻绾傻男》肿又咀寤衔铮惴捍嬖谟谠撕驼婧质的生物合成有重要的调节作用,可参与昆虫的生长发育等多种生理过程。鸟氨琌,.是一种磷酸吡哆醛依赖性酶,广泛存在于动物组织细胞,可催化鸟氨酸脱羧反应,鸟氨酸脱羧是腐胺产生的唯一途径,腐胺在丙胺转移酶的作用下,形成亚精胺继而形成精胺,歉霉程的限速酶。由于昆虫生理过程及多胺代谢过程的复杂性,多胺对昆虫生理过程的调节机理还不清楚,关于肜コ娴墓叵笛芯抗诨刮醇ǖ溃庖泊卵黄蛋白合成的影响,对于进一步明确多胺生理功能,阐明多胺参与昆虫生理过程的机理具有重要意义。本文以棉铃虫为研究对象,在研究腐胺对棉铃虫的生长发育的基础上,采用高效液相色谱和酶联免疫技术分析了多胺对其体内多胺代谢及棉铃虫卵黄原蛋白合成的影响,同时利用技术克隆得到了棉铃虫的蚱巍U项研究将为进一步了解多胺在昆虫体内的生理功能、阐明多胺在棉铃虫卵黄原蛋白合成过程中的生理功能及研究多胺在昆虫生理过程中的分子机制提供重要的虫羽化率及畸形率的影响。结果表明:腐胺对棉铃虫幼虫及蛹的发育历期均有显长,其中经处理的棉铃虫幼虫历期最长,达到.±,与对照渐下降趋势;%.%碜槊蘖宄娴挠计诩灾逃.%处理组,照组之间并无显著差异;与对照组相比,经腐胺处理后,棉铃虫的蛹重均有不同程度的增加,其中处理后的效应最明显,极显著大于其他处理组及对细胞内。目前的研究表明,多胺对生物大分子的合成,细胞的生长、分化及蛋白酸脱羧酶于研究的初始阶段。因此,开展多胺对棉铃虫生长发育及理论基础。主要研究结果如下:在实验室条件下研究了外源腐胺处理后对棉铃虫幼虫的发育历期、蛹重、成著的影响。与对照组相比,经腐胺处理后,,随着腐胺浓度的增加,棉铃虫幼虫历期呈逐%,但处理组、%碜楹投华中农业大学届颁十学位论文
范悦蘖宄娌蚜康挠跋范悦蘖宄嫣迥诟髯橹喟泛康挠跋范悦蘖宄婷频鞍缀铣傻挠跋照,,经腐胺处理后,棉铃虫的蛹和成虫畸形率明显增大,其中蛹的畸形率变化表现为中间浓度腐胺处理组的较高,高浓度和低浓度腐胺处理后蛹的畸形率相对较低;而棉铃虫的成虫畸形率变化则表现为随腐胺处理浓度的增加而降低的趋势;与对照相比,实验结果表明,经过腐胺处理后,棉铃虫的总产卵量与对照相比均没有显的腐胺.%能提高棉铃虫的产卵量,;经过ヅǘ鹊母烦中俏姑蘖宄娑啻螅代棉铃虫平均总产卵量与对照相比,无显著变化;而经持续处理的第棉铃虫平均产卵量急剧下降,仅有#,但与对照相比无显著差异。结果表明,腐胺对棉铃虫的产卵量存在一定程度的影响。研究发现在棉铃虫幼虫期体内腐胺和亚精胺含量一直处于较高的水平,且各期含量变化较大,而精胺一直处于较低的水平,动态变化幅度不大柿衔聪允;改变,而高浓度的腐胺则对棉铃虫体内各组织多胺含量无明显的影响。经外源腐胺持续处理后,棉铃虫幼虫体内各组织两种主要多胺含量均受到明显的影响,特别是经外源腐胺处理的第蘖宄妫渲饕6喟返暮勘浠攵哉障啾却嬖诩成,重链分子量为崃捶肿恿课幻噶C庖卟舛ǖ慕峁砻鳎同浓度的腐胺对棉铃虫的卵黄蛋白合成具有一定程度的影响,经%明显促进了棉铃虫血淋巴内卵黄蛋白合成,在大部分发育阶段,棉铃虫血淋巴内卵黄蛋白含量均高于对照,且峰值提前;而和%著差异,但是处理的棉铃虫平均产卵量最高,,%ǘ鹊母反淼拿蘖宄孀懿蚜孔钌伲砻髟诒臼笛榉段冢团ǘ经低浓度腐胺处理后,棉铃虫各组织内两种多胺和含量均有不同程度的显著的差异。经过甈缬荆ǔ雒蘖宄媛鸦屏椎鞍子梢惶踔亓春鸵惶跚崃醋显抑制了棉铃虫卵黄蛋白的合成,在大部分发育阶段处理组体内卵黄蛋白含量均腐胺对棉铃虫生长发育的影响及云蔚目寺Ⅱ
蘖宄嫖诎彼嵬阳让富蚱蔚目寺关键词:多胺;腐胺;棉铃虫;生长发育;卵黄蛋白;鸟氨酸脱羧酶;院螅团ǘ雀反淼拿蘖宄媛鸦频鞍缀肯降较缓,而高浓度的腐胺处理的棉铃虫卵黄蛋白含量则急剧下降。根据已知虻谋J匦蛄猩杓萍虿⒁铮肦狿的方法克隆获得了与目的片段大小相似的条带,获得了棉铃虫虻腅片段。低于对照,在棉铃虫羽化华中农大学届硕十学位论文
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