文档介绍：重庆大学
博士学位论文
基于脂质体技术的蛋白质类药物传递系统的研究
姓名:戴传云
申请学位级别:博士
专业:生物医学工程
指导教师:王伯初
20060401
中文摘要
摘要
脂质体在生物体内可以降解无毒和无免疫原性作为药物载体具有靶向
性从而减少药物剂量降低毒性减少副作用等优点与传统的脂质体相比
复乳法制备的多泡脂质体(MVLs) 还具有不连续的药物溶液囊泡这些囊泡被连
续的非同心的类脂双分子磷脂膜所分隔具有更多的包封容积和较大的粒径当
某个囊泡破裂时药物只从破裂囊泡释出完整的囊泡仍然可以保持原状因而
有很好的缓释效应但它也同其它传统脂质体一样稳定性差和易被清除脂质
体是被动地捕获药物所以对于水溶性的蛋白质来说低包封率也是一个很难解
决的问题 MVLs纯化后将导致大量的未包封蛋白质药物流失而且分离MVLs本
身也是一个比较复杂的过程
以海藻酸钠(Alg)包覆MVLs和未被MVLs包封的游离蛋白形成一种新型蛋白
质类药物载体系统(MVLs-Alg) 因其良好的材料特性及制备过程温和的反应特性
可能成为极具有潜力的蛋白质类药物的载体系统作为极具潜力的蛋白质类药物
载体系统是否具备高包封率均一的粒径良好的释放性能以及蛋白质的结构
和生物活性稳定等缺乏认识 MVLs和海藻钠之间是否存在相互作用以及
MVLs-Alg的理化性质和稳定性也尚未研究针对上述问题本论文结合脂质体和
微囊化技术建立一种新型蛋白质类药物载体系统对MVLs-Alg的制备过程参数
进行优化并力图认识该载体系统的理化性质稳定性和释放性能进一步研究
该载体系统对蛋白质的结构和生物活性的影响
首先以牛血清蛋白(BSA)为模型药物采用复乳法制备MVLs 然后进一步
利用Alg 采取乳化/内部凝胶化法包封MVLs和游离的BSA 成功制备出高包封率
球型度好尺寸小且分布均匀的MVLs-Alg 考察了过程参数(如药材比磷脂比
Alg浓度搅拌速度等因素)对包封率粒径大小产量和球型度等的影响从而可
以优化制备工艺条件
其次考察了优化后制备的MVLs-Alg粒径大小粒径分布和过氧化值研究
MVLs-Alg在不同保存条件下的稳定性和内部结构变化该载体系统的表面形态圆
mm 提高了MVLs
的包封率和稳定性而且在4 条件下存放相对比较稳定经差示热分析认为
MVLs与Alg之间可能发生了物理吸附作用
再次考察了该载体系统的体外释放行为对释放情况进行拟合并考察不
同工艺条件不同释放介质和不同制备方法对体外溶出度的影响发现该载体在
SBF 等渗液中具有明显的缓释效果与单一的 MLVs 或 Alg 微囊相比体外释放
I
重庆大学博士学位论文
速率明显要慢释放过程与 Weibull 方程的拟合优度较高释放速率受 Alg 终浓度
TO 的含量和制备方法的影响而且和释放介质的 pH 值和离子浓度有关
最后以重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)为蛋白质类模型药物借助分
子筛高效液相色谱圆二色谱及荧光色谱等技术考察从该载体系统中释放出来
的蛋白质类药物的完整性二级结构和分子构象的变化以及监测对小鼠骨髓来
源的CFU-GM集落数的刺激生长情况考察对蛋白质类药物的生物活性的变化结
果表明从MVLs-Alg中释放出来rhG-CSF 的完整性二级结构分子构象和生物
活性并没有破坏说明MVLs-Alg比较适合用于蛋白质类药物的载体系统
关键词蛋白质多泡脂质体海藻酸钠药物传递系统释放性能重组人粒
细胞集落刺激因子
II
英文摘要
ABSTRACT
Liposomes have proved to be biodegradable, nontoxic and do not elicit an immune
response. As a drug deliver system, it has been extended to enhance the drug efficacy
and potency, reduce toxicities of encapsulated drugs and target specific tissue sites.
Multivesicular liposomes (MVLs) prepared by multiple emulsion method are
distinguished from traditional liposomes by the characteristic structure position.