文档介绍：卷期生物工程学报
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年月
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双基因双重组的构建及其杀虫活性
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裴子飞肖化忠齐义鹏" 王福山朱应
(武汉大学病毒研究所武汉)
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摘要质粒携带杆状病毒极早期基因启动子驱动的新霉素抗性基因( ),经酶切回收后插入到
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质粒的位点上,构建成多角体外膜蛋白基因( )失活的转移载体。我们曾构建了一个
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多角体完整( )的表达苏云金杆菌( )截短基因的重组病毒( ) 。为了改进这一重组病毒的
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杀虫效率,将转移载体与重组病毒( ) 共转染细胞,进行第二次同源重组。由于
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基因的表达,用筛选得到重组病毒( ) G; 证明 G 的构建是正确的,经
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分析,重组病毒( )仍然能在昆虫细胞中表达的截短毒蛋白,但不表达的多角体外膜蛋
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白。电镜观察重组病毒( )无多角体外膜,碱解时病毒粒子释放的速度快于重组病毒( )。以重组病毒( )感染甜
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菜夜蛾三龄幼虫, 比野生型病毒小了接近倍, 提前近。
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关键词重组杆状病毒,多角体外膜基因,苏云金杆菌截短内毒素基因,新霉素抗性基因
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中图分类号文献标识码文章编号( )
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目前已发现的杆状病毒有种之多,由于其角体外膜基因( )失活,估计可能加快病毒粒子在
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严格的宿主专一性,并对昆虫自然种群的显著杀灭昆虫肠中的释放,提高感染速度。
效果,因而在害虫防治中得到优先选用,并成为绿色在我们[ ]以前构建的重组病毒(基
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农业的重要组成部分。但与化学农药相比,杆状病因型: / )基础上,进行第二次同源
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毒具有潜伏期长,杀虫速度慢,杀虫谱窄以及对高龄重组,插入新霉素抗性基因( )作报道基因并使其
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害虫需用量大等缺点,其应用受到很大限制。自基因失活,获得带有多重特性的新的重组病毒,
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年代以来,随着对杆状病毒基因组结构与功能研究生物毒力测定超过野生型病毒和亲本重组病毒的杀
的不断深入,人们开始尝试对杆状病毒的遗传性状虫效果。
进行各种分子生物学改造,以期获得优良的病毒杀材料和方法
虫剂。近年来这方面的研究已取得可喜的进展,各&
种工程病毒相继出现,如表达毒蛋白[ ]及截短材料
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毒蛋白[ ],表达蝎神经毒素[ ],表达保幼激素[ ], 质粒带有苜蓿银纹夜蛾核型多角体
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