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细胞工程 复习题.docx

上传人:小雄 2021/7/19 文件大小:70 KB

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细胞工程 复习题.docx

文档介绍

文档介绍:绪论
填空题:写出下列划线部分的英文全称
ATCC was established in 1925 when a committee of scientists recognized a need for a central collection of microorganisms that would serve scientists all over the world.
(American Type Culture Collection) 美国模式培养物保藏所
RNAi , RNA Interference, RNA干扰,是指由特定双链RNA参与指导的,以外 源和内源mRNA为降解目标的转录后基因沉默现象。
HIV, human immunodeficiency virus,
GFP, green fluorescent protein,绿色荧光蛋白,这种蛋白质最早是在水母中发现, 其基因所产生的蛋白质会发出绿色荧光。在生物学领域中,绿色萤光蛋白基因常被用 作为一个报告基因(reporter gene)。
第1-3章细胞工程技术基础
1动物细胞工程实验室的常用设备有哪些?
培养箱、显微操作仪、细胞融合仪、细胞冷冻存储设备、培养用器皿、手术器械。
2为什么观察培养的动物细胞常用倒置显微镜?
倒置显微镜可以从培养皿的下方检查培养物,减少观察时对细胞生长的影响。
FISH:
fluorescent in situ hybridization,荧光原位杂交
FISH is a relatively new technology utilizing labeled DNA probes to detect or confirm gene or chromosome abnormalities that are generally beyond the resolution of routine Cytogenetics.
1细胞培养实验有哪些物理消毒法?
1紫外线消毒 2电离辐射消毒 3湿热消毒 4干热消毒 5过滤除菌
2如何检测培养细胞的生长状况
细胞计数法 2)细胞生长曲线 3)细胞分裂指数
4)细胞贴壁率 5)细胞周期 6) MTT比色法测定细胞活率
3简介培养细胞活率检测常用方法
染料排除检测法:
染料:普通光学染料:台盼兰(trypan blue)>伊红Y (eosin Y)
荧光染料:碘化丙锭(PI)、Hoechst 33258、漠化乙锭(EB)、Hoechst 33342(H342)。 其他染料:FDA (荧光素乙酰乙酸盐)
MTT(唾哩蓝)比色法测定细胞活率:活细胞中脱氢酶能将四哇盐还原成不溶干水的蓝 紫色产物,并沉淀在细胞中,而死细胞没有这种功能。二甲亚飒(DMSO)能溶解沉积 在细胞中蓝紫色结晶物,再用酶标仪测定0D值。
4简介细胞培养中支原体污染的检测方法
1、 相差显微镜观察法
2、 直接培养法
原理:直接培养支原体于培养基中,观察其生长及菌落生成。
特点:是目前最直接与灵敏之步骤,亦是用来评估其它侦测新步
骤的标准步骤。
缺点:培养时间长,须3-5星期才能判断。有些支原体不能在培 养基培养出来。需同时培养支原体株作为正反应对照组, 可能会造成污染。
3、 DNA荧光染色法
原理:利用荧光染剂(bisbenzimide, Hoechst 33258)检测支原体污染。此染剂会结合到DNA 之富含A-T区域,因为支原体之DNA中A-T含量占多数(55〜80%),所以可将其 染色而检测。被支原体污染之细胞经染色后,在细胞核外与细胞周围可看到许多大小 均一之荧光小点,即为支原体之DNA,证明有支原体之污染。
特点:简单、经济与灵敏,广泛使用,可作为例行之侦测步骤。可以侦测不易培养之支原体, 较直接培养法快,约一星期即可知道结果。
缺点:有时仍会有荧光背景,影响判读。
4、 分子生物学方法
1) PCR方法
2) 荧光原位杂交(FISH)
第四章细胞培养
1、 Contact Inhibition,接触抑制,细胞相互接触后,如培养的是正常细胞,山于细胞的相 互接触能抑制细胞的运动,这种现象称接触抑制。
2、 Primary Culture,原代培养,即初次培养,是从供体获取组织后的首次培养。
3、 Barr body,巴氏小体,在哺乳动物体细胞核中,除一条X染色体外,其余的X染色体 常浓缩成染色较深的染色质体,此即为巴氏小体,又称X小体,通常位于间期核膜边缘。
4^ FBS, fetal bovine serum,胚牛血清
5、 CS, calf serum,小牛血清
1) 简介体外培养动物细胞的类型?
1) 贴壁型细胞: