文档介绍：第一章细胞培养
1、 细胞系：原代培养经首次传代成功后即成细胞系，由原先存在于原代培养物中的细胞世 系所组成。
2、 细胞株：通过选择法或克隆形成法，从原代培养物或细胞系中获得的具有特定性质或标 志的细胞群。细胞株的这种特定性或标志必须在整个培养期间始终存在。
3、 传代：体外培养细胞生长增殖达到一定密度后，需要分离出一部分细胞和更新营养液（培 养基），这一过程叫传代。
4、 基本条件：无菌无毒、营养需要、生长环境（pH值、温度、渗透压）
5、 设备：环境（无菌实验室、净化工作台、恒温培养箱、C02罐）
储存（液氮储存罐、液氮运输罐、超低温冰箱）
处理（倒置显微镜、离心机、高压蒸汽消毒器、干燥箱、高温烤箱）
6、 培养基必须具备的基本条件：
营养物质、缓冲能力、等渗性、无菌
7、 生长状态指标：
细胞生长曲线&生长倍数、细胞分裂指数、细胞接种存活率、克隆形成率
8、 细胞生长曲线：接种培养一计数一制图；
曲线近似“S”形，潜伏期一对数生长期一平台期；
生长曲线反映的是某一特定培养条件下的细胞增殖规律。
第二章肿瘤细胞
1、 癌基因的产物：原癌基因的产物主要包括：①生长因子，如sis,②生长因子受体，如fms、 erbB,③蛋白激酶及其它信号转导组分，如src、ras、raf,④细胞周期蛋白，如bcl-1,⑤ 细胞凋亡调控因子，如bcl-2,⑥转录因子，如myc、fos、jun»
2、 原癌基因的描述判断：原癌基因是细胞内与细胞增殖相关的基因，是维持机体正常生命 活动所必须的，在进化上高等保守。当原癌基因的结构或调控区发生变异，基因产物增多或 活性增强时，使细胞过度增殖，从而形成肿瘤。
3、 P53基因描述：转录调节因子；使癌细胞凋亡，防止癌变；还具有帮助细胞基因修复缺 陷的功能。
4、 肿瘤细胞体外培养的生物学特性：
形态和性状（形态不规则，界限清晰，伸展较差，核膜、核仁轮廓明显，核仁多、核浆 丰富|折光性强，表面微绒毛多）
生物特性（营养要求不高，自分泌促增长因子，生长方向性消失、失去接触抑制，细胞 倍增周期短）
永生性、侵润性、异质性、细胞遗传性。
第三章污染控制、冷冻保存
1、 细菌、真菌污染的控制：过滤除菌（ pm）、抗生素（预防用药：①双抗生素---青霉 素，链霉素，②真菌：***霉素B；污染后清除用药（在污染早期可能有效）：需采用大于 常用量5-10倍的冲洗法，于加药后作用24-48小时，再换常规培养液。）
2、 支原体污染的用药控制：抗生素（Cip, BM-l+BM-2, M-plasmocin）方便经济有效、加温 处理、支原体特异的抗血清
3、细胞冻存和复苏的方法步骤：
冻存：①常规技术消化并收集细胞于离心管中离心；②去上清，逐滴加入4°C预冷的冻 存液，轻轻重悬细胞后，均匀分装于冻存管中，做好标记；③尽快将冻存管装于纱布袋中， 悬于液氮液面上方或低温冰箱
（-70°C）过夜；④次日转入液氮中。
复苏：从液氮罐中取出冻存管——迅速放入38 °C水浴中，并不时摇动，在1分钟内使 细胞完全融化一一无菌条件下逐滴转移至加有适量培养液的离心管中一根据细胞的要求 离心，弃上清——加入适量培养液，轻轻重悬细胞，接种培养过夜（接种浓度一般<106/ml） —次日更换培养液，继续培养