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高中生物选修三基因工程主要知识点.doc

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高中生物选修三基因工程主要知识点.doc

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高中生物选修三基因工程主要知识点.doc

文档介绍

文档介绍:高中生物选修三基因工程主要知识点(、)
基因工程:按照人们的意愿,进行严格的设计,并通过体外DNA重组和转基因等技术,赋予生物以新的遗传特性,从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。
基因工程的三大工具:限制性核酸内切酶—“分子手术刀”;DNA连接酶—“分子缝合针”;基因进入受体细胞的载体—“分子运输车”。
限制性核酸内切酶的特点:能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列,并且是每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键。
限制酶识别序列的特点:反向对称,重复排列。
限制酶在原核生物中的作用:切割外源DNA,保护细菌细胞。
为什么限制酶不剪切原核生物自身的DNA分子? 原核生物本身不含相应特异性序列;对DNA分子进行***化修饰。
两种常见的DNA连接酶:E·coli DNA连接酶:源自大肠杆菌,只连接黏性末端;T4DNA连接酶:提取自T4噬菌体,两种末端均可连接,连接平末端效率低。
DNA连接酶和DNA聚合酶的相同点:都是蛋白质;都能生成3'磷酸二酯键。不同:前者在两个片段之间形成3'磷酸二酯键,后者只能将单个核苷酸连接到已有片段上;前者不需要模版,后者需要。
载体需要满足的条件:有一到多个限制酶切点;对受体细胞无害;导入基因能在受体细胞内复制和表达;有某些标记基因;分子大小合适。
质粒:一种裸露的、结构简单、独立于细菌拟核DNA之外,并具有自我复制能力的很小的双链环状DNA分子。
标记基因的作用:鉴别受体细胞中是否含有目的基因,从而将含有目的基因的细胞筛选出来。
三类载体:质粒;λ噬菌体的衍生物;动植物病毒。
获取目的基因的方法:说法一:从自然界已有的物种中分体(鸟枪法、反转录法)、用人工的方法合成;说法二:从基因文库中获取(鸟枪法、反转录法)、利用PCR技术合成、用化学方法人工合成。
基因库:一个物种中全部个体的全部基因的总和;基因文库:将含有某种生物不同基因的许多DN***段,导入受体菌的群体中储存,个个受体菌分别含有这种生物的不同的基因;基因组文库:含有某种生物全部基因的基因文库;部分基因文库:只含有一种生物部分基因的基因文库;cDNA文库:用某种生物发育的某个时期的mRNA反转录产生的多种互补DN***段,与载体连接后储存在一个受体菌群中。

文库类型
cDNA文库
基因组文库
文库大小


启动子


内含子


基因多少
某种生物的部分基因
某种生物的全部基因
物种间基因交流
可以
部分基因可以
人工合成目的基因的两个条件:基因比较小;核苷酸序列已知。
目的基因:主要是指编码蛋白质的基因,也可以使一些具有调控作用的因子。
启动子的特性:物种特异性、组织特异性、强弱差异。
基因工程的步骤:目的基因获取、构建基因表达载体、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。
PCR的全称:多聚酶链式反应。
PCR扩增目的基因的条件:dNTP、引物、Taq酶、DNA模版
PCR技术扩增目的基因的过程:90-95℃,模版解旋;55-60℃,退火,引物与模版结合;70-75℃,Taq酶合成互补链。
基因工程的核心:构建基因表达载体。
构建基因表达载体的作用:使目的基因在受体细胞内能稳定存在,并遗传给下一代;使目的基