文档介绍：生医2012秋
生理学实验报告
指导教师: 实验员: 学 号: 联系方式:
实验一骨骼肌的观察及骨骼肌的单收缩与强直收缩
【目标要求】
掌握蛙类动物单毁髓的实验方法。
掌握坐骨神经-腓肠肌标本和坐骨神经干标本的制备方法。
学****肌肉收缩的记录方法。
观察与分析肌肉单收缩的三个时相，分析骨骼肌收缩形式与刺激频率之间的关系。
【基本原理】
蛙类动物的某些基本生命活动，如神经的生物电活动、肌肉收缩等与哺乳动物相似。其 离体组织所需的生活条件比较简单，易于控制和掌握，而且动物来源丰富，因此在生理学实 验中常用蟾赊的坐骨神经一腓肠肌标本永和坐骨神经标本来观察组织的兴奋性、刺激与反应 的规律以及骨骼肌收缩的特点等。
肌肉受到一次阈上刺激而产生的一次收缩为单收缩，其过程可分为三个时相，即潜伏期、 缩短期与舒张期。肌肉收到连续的阈上刺激时，如果刺激间隔小于单收缩的时程，相邻两单 收缩的时相会出现融合，表现为强直收缩现象。如果表现为每次收缩的开始发生在上次收缩 的舒张期，称不完全强直收缩，如果表现为每次收缩的开始发生在上次收缩的缩短期，称完 全强直收缩。躯体运动是以骨为杠杆，以关节为枢纽，由肌肉收缩产生动力完成的。
【材料与器械】
蟾赊或蛙，蛙类手术器械（手术剪、手术镶、眼科剪、眼科银、金冠剪、毁髓针、玻璃 针、固定针），蛙板，玻璃板，锌铜弓，小烧杯，滴管，纱布，细棉线，任氏液。
BL-420生物机能实验系统（或其他生理记录仪），张力换能器。
【实验步骤】
双毁髓的方法
一手握蟾赊，食指按压头部前端，拇指压住躯干背部，令其背部向上，头向前俯；另一 手持毁髓针在左右耳后腺之间，背部的凹陷处将毁髓针垂直刺入，然后将针尖向前刺入颅腔, 搅动以捣毁脑组织，此时的动物为单毁髓动物。彻底捣毁脊髓时，可见蟾赊后肢突然蹬直， 然后瘫软。如动物仍表现四肢肌肉紧张或活动自如，表明未毁坏脊髓，必须重新毁髓。
剥制后肢标本
将双毁髓的蟾赊背面向上放在蛙板上，一手持手术银轻轻提起两前肢之间背部的皮肤, 另一手持手术剪横向剪开皮肤，暴露脊柱。用金冠剪横向剪断脊柱。一首持手术银提起断开 的脊柱后端，另一手用金冠剪沿脊柱两侧剪开体壁，再剪断下腹壁肌肉，使头部、前肢及内 脏自然下垂，将其自腹后壁剪除。然后用蘸有任氏液的左手捏住断开的脊柱后端，右手向后 方撕剥皮肤，将剥干净的后肢放入盛有任氏液的培养皿中。弃其头部、内脏及剥下的皮肤， 清洗手及手术器械上的污物。
分离两后肢
左手托起去皮的标本，右手持金冠剪直接剪开耻骨联合，随后剪开两后肢相连的肌肉组
织，并纵向剪开脊柱(尾杆骨留在一侧)，将标木一分为二，一只继续剥制标木，另一只放 入任氏液中备用。
分离坐骨神经
取一侧后肢的脊柱端腹面向上，趾端向外侧翻转，使其足底朝上，用固定针将标本固定 在玻璃板下面的蛙板上。用玻璃针沿脊神经向后剥离坐骨神经。沿腓肠肌正上方的股二头肌 和半膜肌之间的肌缝找出股部的坐骨神经，坐骨神经基部有一梨状肌盖住神经，用玻璃针轻 轻挑起此肌肉，便可看清其深层穿彳丁的坐骨神经。剪断梨状肌，完全暴露坐骨神经，再用玻 璃针轻轻挑起神经，自上而下剪去支配腓肠肌之外的其他分支，将坐骨神经游离至胭窝处。 用金冠剪剪去多余的脊柱骨及肌肉，只保留坐骨神经发出部位的一小块脊柱骨。取下脊柱端 的固定针，用手术银轻轻提起脊柱骨的骨片，将神经搭在腓肠肌上。
5•游离腓肠肌
用玻璃针将腓肠肌与胫腓骨分离开，用手术刀片将腓肠肌跟腱与胫腓骨分离开一段，用 手术银在腓肠肌跟腱下穿线并结扎，提起结扎线，剪断跟腱与胫腓骨的联系，游离腓肠肌。
分离股骨
一手捏住股骨，沿膝关节剪去股骨周围的肌肉，用金冠剪刮干净股骨上的肌肉，保留股 骨的远端二分之三，剪断股骨。剪去膝关节下部的后肢，保留腓肠肌与股骨的联系。
检验标本
用手术银轻轻提起标本的脊柱骨片，使神经离开玻璃板，持经任氏液蘸湿的锌铜弓，使 其两极轻触神经，如腓肠肌反生收缩，则表示标本机能正常。提起腓肠肌上的结扎线，勿使 神经收到牵拉，轻轻将标本放入任氏液中，稳定5-10min,即可用于实验。
&将坐骨神经-腓肠肌标本的股骨部分插入肌槽的固定孔内，拧紧固定螺丝，将坐骨神经放 在电极上，将跟腱上的结扎线与张力换能器相连。
-420生物机能实验系统(或其他类型的生理记录仪)记录单收缩和强直收缩，步骤 如下：
将张力换能器在肌槽上方与肌槽平行地固定于铁支架上，将标本上的结扎线缚于张力 换能器悬梁壁上，将换能器输出的插头连于BL-420生物机能实验系统。
将BL-420生物机能实验系统的输出电极连于肌槽电极上。选择采样频率、显示方式、 显示通道、时间常数、高频滤波，必要时还要选择50Hz陷波；记录时选择刺激标记。
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