文档介绍：分析:刺激电压低于阈上刺激,神经不兴奋,肌肉也不会收缩。当电压达到阈强度,神经开始兴奋, 肌纤维才开始收缩。当刺激频率增大时, 如果刺激频率小于骨骼肌收缩舒张频率就可以看到数个比较完整的收缩舒张波(从零电位到峰值,再由峰值回到零电位) ,而当刺激频率大于骨骼肌收缩舒张频率时, 骨骼肌一次收缩后还没来得及舒张完全就又受到电刺激重新达到收缩峰值, 刺激频率增大到一定强度时就几乎看不到骨骼肌舒张的波形, 持续收缩直至僵直。【注意事项】 1. 双毁髓时应注意使蟾蜍头部前俯,用纱布盖在耳后大腺上,防止耳后腺分泌物射入眼内。如分泌物射入眼内,应立即用生理盐水冲洗眼睛。标本制备过程中应经常滴加任氏液,防止标本干燥。【思考题】 1、剥去皮肤的后肢,能用自来水冲洗吗?为什么? 答:不能。自来水是低渗溶液,会使肌细胞失水萎缩,影响活性和实验结果。 2、金属器械碰压、触及或损伤神经及腓肠肌,可能引起哪些不良后果? 答: 金属器械碰压神经与腓肠肌, 会引起肌肉收缩, 如果碰的较重, 损伤部位及近端的神经就死亡了,以后刺激只能从损伤处向肌肉处之间的部分。另外容易使标本疲劳,失去活性。 3、如何保持标本的机能正常? 答:金属器械不要碰及、损伤神经或腓肠肌,保持湿润,常加任氏液,最好先泡一会。实验二蟾蜍离体蛙心灌流【目的要求】 1. 学****两栖类动物离体心脏的灌流方法,掌握斯式插管法; 2. 证明心肌具有自动节律性收缩的生理特征; 3. 观察钠离子、钙离子、钾离子、肾上腺素、乙酰胆碱对心脏活动的影响; 4. 理解内环境各种理化因素的相对恒定对于细胞进行正常生命活动的重要意义。【基本原理】心脏离体后, 仍能有节律地自动收缩、舒张, 此为心肌的自动节律性。两栖类动物的心脏没有冠状动脉, 心肌细胞直接从心腔中的血液中获得营养物质和氧气, 因而可用斯式插管法进行离体心脏灌流。灌流液的成分应同动物内环境的成分基本一致, 用于两栖类动物心脏的灌流液为任氏液。始终有任氏液灌流于心腔, 离体心脏可长时间地活动, 改变灌流液的成分则可引起心脏活动的改变。【材料与器械】蟾蜍或蛙,蛙心套管,套管夹,支架,双凹夹,滑轮,烧杯,常用手术器械,蛙板,蛙心夹,微机记录系统或二道记录仪,张力传感器,滴管,小烧杯,纱布,棉线,任氏液, %NaCl , 5%NaCl , 2%CaCl2 , 1%KCl , 1/5000 肾上腺素, 1/10 000 乙酰胆碱。【实验步骤】 1. 暴露心脏取一只蟾蜍, 用探针破坏脑和脊髓。双毁髓后, 将其仰卧于蛙板上。一手持手术镊提起胸骨后方的皮肤,另一手持解剖剪剪开一个小口,然后将剪刀由开口处伸入皮下,向左、右两侧下颌角方向剪开皮肤。将皮肤掀向头端, 再用手术镊提起胸骨后方的腹肌, 在腹肌上剪开一口,将解剖剪紧贴体壁向前伸入,并沿皮肤切口方向剪开体壁,剪断乌喙骨和锁骨,使创口呈一倒三角形。一手持眼科镊,提起心包膜,另一手用眼科剪剪开心包膜,暴露心脏。在腹面可以看到一个心室, 其上方有两个心房。心室右上角连着一个动脉干, 其根部膨大为动脉圆锥。动脉干向上分成左、右两支主动脉。用玻璃针从动脉干背部穿过, 将心脏翻向头侧。在心脏背面两心房下面, 有一个呈紫红色的膨大部分, 为静脉窦, 是两栖类动物心脏的起搏点。静脉窦连左、右前腔静脉, 后连一个后腔静脉; 后腔静脉近窦处, 有左、右肝静脉汇入。 2. 离体心脏制备斯式插管法分四步: 1) 动脉切口:在动脉干分支处下方穿过一线,并打一活结留作固定套管用。在左主动脉下方穿过一线, 稍离动脉干分支处结扎。左手提起左主动脉上的结扎线, 右手用眼科剪在结扎线下方近动脉圆锥处、沿向心方向将左主动脉壁剪一“V”斜口。 2) 套管入室:取一尖端大小适宜的斯式蛙心套管,加入少量任氏液,达套管内 2~3c m 高度即可。左手用小镊子夹住切口缘, 轻轻上提, 使切口扩大; 右手持蛙心套管, 自切口处插入动脉圆锥。然后, 左手持主动脉上的结扎线向后拉, 右手推送蛙心套管, 使之进入动脉圆锥。当套管尖端到达动脉圆锥基部时, 将套管稍稍后退, 使尖端向动脉圆锥的背部后下方及心尖方向推进。在心室收缩时, 将套管经主动脉瓣间隙插入心室腔内。进入心室后, 血液冲入套管, 并使液面随心脏波动而上下移动。如果套管没有顺利插入心室, 应改变方向慢慢试插,不用蛮力。插入心室后不可插得过深,以免心室壁堵住套管口。 3) 固定套管:待套管尖端插入心室后,轻轻提起备用线,将左、右主动脉连同插入的套管用双结扎紧, 再将结扎线固定在套管的小玻璃钩上, 以防标本滑脱。用滴管吸去套管中的血液,更换新鲜任氏液。 4) 游离心脏:先将结扎线上方的左、右主动脉剪断。然后轻轻提起套管和心脏,看清静脉窦的位置。于静脉窦下方剪断所有的组织, 使心脏离体。在结扎和剪断时, 切勿