低压组合层析从草药蛇足石杉中同时分离纯化石杉碱甲和石杉碱乙的研究.pdf

文档介绍：北京化工大学
博士学位论文
低压组合层析从草药蛇足石杉中同时分离纯化石杉碱甲和石杉
碱乙的研究
姓名：李秀男
申请学位级别：博士
专业：生物化工
指导教师：马润宇;苏志国
20051125
低压组合层析从草药蛇足石杉中同时分离纯化石杉碱甲和石杉碱乙的研究摘要分离提纯效果。研究内容涉及草药蛇足石杉中两个目标产物石杉碱甲和石杉碱乙的分离纯化效果，表明由于分辨率低，且存在产物的不可逆吸附，石杉碱甲的回石杉碱甲和石杉碱乙在杞荷峡梢缘玫讲糠址掷耄ǚ掷攵冉系停虼瞬本文以低压层析提纯植物天然产物为目的，通过选择层析介质实现低压条件下的制备层析操作，再利用不同层析步骤间的优化组合达到高纯度、高回收率的的同时分离纯化，通过浸提及三步低压层析的过程优化组合，实现了两者的简捷、高效提纯。’论文首先选择了专一性好的腈基柱。，结合固相萃取，建立了适合的目标产物的快速、准确、重现性好的分析检测方法，作为在分离过程的跟踪检测目标产物的手段。研究了蛇足石杉的浸提条件，发展了简单有效的浸提方法，即用チ蛩崾椅浸泡两次，每次一天，固液比分别是：痸＝鲆褐惺技罴缀石杉碱乙的平均回收率分别为．ズ％。研究了大孔吸附树脂层析取代多步的液液萃取操作进行浸出液的富集浓缩过程，筛选了一系列树脂，确定了作为初分离的介质。优化了大孔吸附树脂层析的条件，使石杉碱甲和石杉碱乙的含量分别从％和％提高到了ズ蚈．ィ炕妒蛔詈蟛锏幕厥章史直鸫锏搅％和从大孔吸附树脂层析初分离得到的粗品出发，参照文献研究了硅胶正相层析收率和纯度都很低，而石杉碱乙得不到有效回收。探索了反相层析分离纯化粗品中石杉碱甲和石杉碱乙的工艺。首先以通用型的瞎杞航橹蔣剿髁朔聪嗖阄龆源制贩掷氪炕Ч峁砻的纯度和回收率均不理想；用新型的橹蚀娲车腃键合硅胶介质反相北京化工大学博士研究生学位论文。ァ
聪嗖阄鋈コ制分械木蟛糠衷又剩秒婊阄鼋技罴缀褪技钜关键词蛇足石杉，石杉碱甲，石杉碱乙，低压组合液相层析，分离纯化。层析能提高分离度和避免产物的不可逆吸附，同时大大提高分离速度，但仍未实现基线分离；而腈基介质具有对石杉碱甲和石杉碱乙的特殊选择性，因此可以将它们完全分离。对分离效果较好但载量较低碗婊聪嗖阄鼋辛擞行У淖楹希从完全分离，从而使分离载量大大增加。经组合层析，获得的两种产物纯度均为％以上，回收率达到了％左右，同时可以省略结晶步骤，避免产物在结晶过程时产生的大约％的损失。蛇足石杉经上述稀硫酸浸提、大孔吸附树脂层析、组合的聪嗖阄龊碗基柱层析四步，石杉碱甲和石杉碱乙的含量可以分别从ズ．％提高到大于％，总的回收率分别为．ズ％。整个工艺的生产周期为欤远低于文献所报道的鲈隆北京化工犬学博士研究生学位论文
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学位论文作者签名：镌粤餱年其琦日北京化工大学学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均己在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。
第一章文献综述有更为多变的化学性质，其中不少还具有明显的生理活性，它们构成了植物天然安全性和可靠性的考虑。中药现代化发展纲要指出0烊涨恐幸┨崛　⒎掷搿⒋炕裙丶际醯研究和先进适用技术的推广应用。我国的植物资源丰富，且中医药学为中草药的植物天然产物分离纯化的意义广义而言，任何生物分子都是一种天然产物，但是这～概念通常用来指次生代谢产物癳殖贫未徊铮从谢逅模肿量小于的那些小分子。而这些小分子且并非是有机体生存所必需的，不象更为普遍的大分子诸如蛋白质、核酸以及多糖等那样，它们构成了生命的更为基础的过程中的基本的结构【俊Ｖ参镏械拇紊徊锲浞肿咏闲∏医峁狗岣欢嗖剩产物研究的物质基础。天然产物研究的成果已广泛应用于医药和保健业，为保障人类健康提供了许多有价值的药物。从植物中提取的一些产物，大多数具有针对性强、毒副作用小等特点，是医药工业中新药研究的主要源泉之一。世界范围内天然产物活性成分的研究已成为制药、药理及临床应用等方面的研究热点。据估计，全世界％的处方药来自植物：世界卫生组织娑ǖ种基本及关键药