文档介绍：阿尔兹海默症血清多肽组生物标志物研究
摘要采用个体样品单独分析的方式分析，比拟9个健康对照者、10个阿尔兹海默症〔Alzheimer′sdisease，AD〕患者和12个认知功能障碍〔Mildcognitiveimpairment，MCI〕患者的血清多肽组分析结果，以寻找潜在的AD病生物标志物。结果说明，高强度的α2巨球蛋白肽段VGFYEDVMGR与AD病晚期阶段密切相关，而载脂蛋白CⅢ、组蛋白12和组蛋白14的大量降解，那么与中早期AD和认知功能障碍相关联；载脂蛋白CⅢ和组蛋白1的降解肽段具有明显的阶梯序列特征，但在不同样本中的分布具有一定偶然性。AD病开展的晚期与中早期的血清多肽组特征不同，这4种蛋白质的降解有可能成为AD病潜在的生物标志物。研究结果也证明了，归属于纤维蛋白原α链、胸腺素β4和斑联蛋白等蛋白质的肽段是所有血清样本中的优势肽段。本研究提出了利用血清多肽组学方法辅助诊断AD病的方法，为临床大规模验证提供了依据和参考。关键词多肽组；生物标志物；血清；阿尔兹海默症；认知功能障碍1引言阿尔兹海默症〔Alzheimer′sdisease，AD〕是一種与年龄相关的神经退行性疾病，AD病目前尚无法治愈和逆转，早期干预和诊断是延缓AD发生的重要途径＼[1＼]。神经心理学量表测试、影像学检查和生物标志物检测是诊断AD病的3种主要方法＼[2＼]。生物标志物是能够预测或反映特定生物过程变化的物质＼[3＼]，目前公认的AD病生物标志物是脑脊液〔CF〕中淀粉样蛋白Aβ42水平的下降和磷酸化tau蛋白水平的升高＼[4＼]。但是，脑脊液检测是有损分析，作为一种常规性检测很难普及，而在血液、唾液和尿液等体液中寻找AD病的生物标志物，具有取样方便和无创伤性的优点，其中以血液在临床上最为常用。Lista等＼[5＼]对基于质谱的AD病血液生物标志物进行了综述，汇总了约20种蛋白质的含量改变和氧化应激可成为AD病的生物标志物，并强调AD等神经退行性疾病的分子水平上的改变在出现临床病症的20年以前就可能发生。血液中tau蛋白和Aβ42的含量很低，不是理想的AD标志物，但炎症和免疫相关蛋白质与AD病关系密切＼[6＼]。在前期工作中，本研究组利用iRAQ定量标签技术比照AD病患者和年龄匹配对照组血清中的蛋白质，发现了100A8等25种差异表达蛋白，有可能成为潜在的AD血液生物标志物＼[7＼]。血液中磷脂类等小分子化合物也被用来预测AD病＼[8＼]。O′Bryant等＼[9＼]指出，基于血液的AD生物标志物在过去十余年取得了显著进展，分析时间降低，可接受性增强，但重复性较差和缺少不同实验室之间的交叉验证制约了研究成果向医学临床的转化。尽管血液中多种蛋白质被认为有望成为AD病生物标志物，但目前尚未见AD病多肽组生物标志物的相关报道。氧化石墨烯磷酸镧纳米磁性复合材料〔LaGM〕由石墨烯、LaPO4纳米棒和Fe3O4纳米粒子构成，可快速富集生物样品中的低丰度多肽＼[10＼]。在前期研究中，本研究组利用该材料别离多肽，建立了纳升液相色谱高分辨串联质谱分析的血清多肽组鉴定方法＼[11＼]。本研究采用单个样本逐一分析的方式，通过比照AD组、认知功能障碍组〔Mildcongnitiveimpairment，MCI〕和健康对照组血清多肽组结果的差异，从蛋白质异常降解的角度寻找潜在的AD病标志