文档介绍：中国农业大学
硕士学位论文
水稻抑制衰老嵌合基因的遗传转化及多基因共转化的研究
姓名:李影
申请学位级别:硕士
专业:植物遗传育种
指导教师:孙传清;唐祚舜

要炒%摘用基因枪转化法,对抑制衰老的嵌合基因在水稻中进行了转化,对不同转化受体,不同类型的水稻品种转化情况进行了比较。研究了外源基因在水稻中的整合和表达情况。另外,用基因枪法把含不同目的基因的鲋柿T靥逡:旌虾蠖运酒分种谢中花进行共转化,对后代外源基因的整合情况做了一些研究,获得结果如下:没蚯狗ǎ裀H隕、明恢、、培矮母鲷痰酒分郑竦昧丝剐钥剐陨秆』騈的┰龊偷阍咏槐砻鳎蟛糠挚剐灾甓急硐治Q粜裕得骶严格的筛选,基本防止了假阳性及嵌合体的出现,转化频率因品种而异,最高为ァ贸墒炫哂俗橹陀着哂俗橹鑫W;芴澹;Ч钜觳幻飨裕蛴着哂耸季节限制,因此成熟胚进行转化更简便易行。蚯棺;谙钟幸糯;逑抵惺芑蛐拖拗坪艽螅疽子隰痰荆痰敬蟛糠制分ü宰;蛑仓晗赴至阉氐暮俊⒁堵趟睾坎舛ǎ得魉ダ咸匾炱舳釉谒咎异时期中启动,虮泶铮鸬搅艘种埔镀ダ系淖饔谩嗷虻墓沧;芯勘砻鳎撼泵顾氐纳秆⌒Ч谒局蟹浅@硐耄儆蟹亲;赴逸现象发生,基因共转化频率较高。关健词:水稻抑制衰老共转化基因枪转化植株。转化较难成功。、一。
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把文献综述及立题依据植物基因工程是近二十年来随着闹刈榧际酰虻囊糯;际酢⒅参锏淖橹培养技术以及目的基因整合与表达的检测技术的发展而迅速兴起的一门生物技术,是将特遗传特性发生定向的、永久性的变化,如此通过基因工程手段,突破种属界限,按人们的预想去创造更加优良的植物新品种是常规遗传育种手段所无法比拟的,植物基因工程在发展农业方面的巨大应用潜力,愈来愈引起世人的瞩目,基因工程不但能补充农作物育种中所需要的基因和种质资源的多样性,而且可以缩短培养新品种及杂种组台的周期,在不改变原有优良性状的情况下下定向改良某些性状,增加育种的有效性,另外,植物基因工程也为农业化学、食品加工、特产化学及制药工程发展新产品与新制造工艺,提供了新的机自从年利用农杆菌转化法获得首例转基因烟草以来,国内外科学家已成功创造了耐除草剂,抗病虫、抗逆、品质改良、雄性不育、生物反应器等具有新性状的转基因植物,其中许多转基因植物已投入生产,例如抗虫棉花、抗除草剂的大豆、耐贮番茄等,现在转基因植物已扩展到包括经济作物、粮食作物、蔬菜、花卉、药用植物、水果、树木以及牧草等在内的个属,喔鑫镏郑乇鹗墙改昀矗捎诨蚯购浠鞣ā⒌缁鞣ā⒊处理等一系列新的转化方法的出现,既克服了农杆菌介导转化的宿主限制,又绕开了繁琐复杂的原生质体的培养,使许多原来很难进行遗传操作的植物也相继转化成功。几十年来,核基因转化一直是植物基因工程的主要研究方向。然而随研究的深入发展,人们逐渐认识到核基因转化有其难以克服的弊端,例如,细胞核基因组大,背景复杂,导入的外源基因难以控制,外源基因表达率低,后代不稳定,对于来自原核的基因必须加以修饰改造等,质体基因转化在一定程度上克服了核基因转化的不足,具有独特的优越性。近几年来,,提高水稻单产是保证我国世纪粮食自给的重要举措,基因工程的发展为培育高产优质水稻品种提供了一条高效的改良途径。年代末以来,应用于水稻的遗传转化方法包括:ā⒌缁鞣ā⒒蚯狗ā⑸诚赴;ā⑾晕⒆⑸法、质脂体法、超声波法、浸渍法、农杆菌法等。目前以基因枪法和农杆菌法最为常用,定的外源基因与合适的表达元件和转化载体进行重组,然后引入到受体植物细胞内,使其转基因涉及的性状包括品质改善、抗病、抗虫、抗除草剂、抗盐、抗旱等等。会。
转化方法植株,年和陡梅ń玁基因导入籼稻中并得到可育转基因植株及其后代,.侍宓淖;早期的转化实验一般都是以原生质体作为受体材料,目前能采用这种方法的水稻仅局谴俳侍迦诤系囊恢只镏剩庠椿蛴朐侍骞才嘌奔尤隤可以促进原生质体摄入外源基因的能力,年℃首次通过ò裈瓺转入烟草原生质体,等首次应用于水稻原生质体获得转基因愈伤组织,第一次获得水稻转基因植株,这种方法操作费时,烦琐而且栽侍逵卸竞ψ饔谩电击法通过对原生质体连续瞬间高压放电造成原生质膜穿孔,使外源基因在质膜的复原过程中进入原生质体内,—状谓溆τ糜谒疽糯;珻基因在水稻细胞中得到了瞬时表达。年,李宝健等用自制的电容放电式电激仪获得了转基因籼稻此种方法利用不完全酶解的细胞,作为转化受体,而