文档介绍：实验二
马立克氏病琼脂扩散实验
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鸡马立克氏病是由
鸡马立克氏病病毒
（MDV）引起的鸡的一种
肿瘤性传染病。临床上以
消瘦、麻痹、皮肤和内脏
出现肿瘤为主要特征。可
造成严重的经济损失，是
世界养鸡业的主要疾
病之一。
鸡马立克氏病引起的劈叉姿势
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流行病学
临床症状
病理组织学检查
病毒分离鉴定
血清学试验: ① 琼脂扩散实验(OIE推荐的替代试验方法)
马立克氏病诊断主要根据
② 酶联免疫吸附实验
AGP可用于20日龄以上马立克氏病鸡羽髓抗原检测和1月龄以上鸡血清抗体检测。
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目的要求
了解琼脂扩散试验进行疾病诊断的操作和结果判定方法

仪器与材料
器材：琼脂打孔器、微量移液器或带胶乳头滴管、平皿等。
试剂：马立克氏病标准抗原、标准阳性血清和标准阴性血清。
实验类型
单向单扩散、单向双扩散、双向单扩散、双向双扩散
实验目的要求、类型、仪器与材料
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利用可溶性抗原和抗体在半固体凝胶中进行相向扩散反应，当抗原抗体分子相遇并达到适当比例时，就会互相结合、凝集，在两孔之间比例最合适的位置上出现白色沉淀带，从而判定相应的抗体和抗原。
可用于20日龄以上马立克氏病鸡羽髓抗原检测和1月龄以上鸡血清抗体检测。
实验原理
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实验原理
琼脂糖的疏散网状结构有利于大分子的自由迁移；
合适比例的抗原抗体结合后聚集形成沉淀；
沉淀的产生阻止抗原抗体复合物的自由运动；
沉淀带一经形成，就像一道特异性的屏障一样，继续扩散而来的相同的抗原抗体，只能是沉淀带加浓加厚，而不能再向外扩散，但对其他抗原抗体系统则无屏障作用。
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沉淀线的特征与位置：
1 抗原、抗体的特异性和浓度
2 抗原、抗体分子的大小
3 扩散率
实验原理
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，此沉淀带的位置主要决定
于两者的扩散系数。
，则沉淀带向抗体偏移，反之亦然。
实验原理
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实验原理
抗原分子量>抗体分子量
抗原分子量=抗体分子量
抗原分子量<抗体分子量
c.
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1%琼脂粉
PBS
封底
1／万硫柳***
水浴加热融化
实验步骤
琼脂平板制备
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