文档介绍：沈阳农业大学
硕士学位论文
昆虫病原线虫共生细菌5-5B菌株的鉴定及发酵条件研究
姓名:刘洪敏
申请学位级别:硕士
专业:农业昆虫与害虫防治
指导教师:丛斌
20070501
导师獬。‘多静/砷呷学位论文作者签名:邑呵签字吼砷年/月心学位论文作者签名:≥琛峻期印‘》,汇编学位论文。C艿难宦畚脑诮饷芎笫视帽臼谌ㄊ本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得沈阳农业大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。本人完全了解沈阳农业大学有关保留、使用学位论文的规定,有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅。本文授权可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印,缩印或扫描等复制手签字日期:.厂年年≯
摘要用表观分类的方法对本实验室年自斯氏线虫体内分离出的一株共生菌高毒力菌株辛诵翁鄄旒吧砩卣鞯牟舛ā=峁砻鳎甑男翁卣骱生理生化特点与致病杆菌属中已知五种中的嗜线虫致病杆菌的特征较为一致,据此根据表型特征的分类方法可以判断该菌株为致病杆菌属认叱嬷虏「司窒乱桓鲋晗怠研究了昆虫病原线虫共生菌菌株的发酵条件,结果表明:甑淖钍噬长温度为,最适起始值为~,最佳振荡频率为/耙毫课/泳课%。菌株发酵液对小菜蛾初孵幼虫的杀虫活性研究表明,装液量为/保U劳雎饰ィ唤泳课%时,校正死亡率为.%;起始为时,校正死亡率为.%。测定了发酵液中糖、蛋白质,氨基氮含量变化,值的总体变化规律为急剧下降到零,后开始逐渐上升,最后稳定在蛔芴呛突乖堑暮烤咧鸾ソ档偷那魇疲在蠓直鹞榷ㄔ./,痬笥遥焕每悸硭沽晾斗ú舛ǖ鞍字屎的变化,洌鞍字实暮炕郝陆档模拥迹恋浼本缦陆担蠡厣后蛋白质含量稳定在笥遥话被5谋浠媛晌K孀攀奔涞难有氨基氮的含量总体趋势是逐渐增加的,在第贝锏阶罡呶狾./。筛选发酵所需碳源、氮源和无机盐,/;最佳氮源为%牛肉膏,,产菌量最大为个/。用甓种参锊≡婢木恳志辛耸匝椋峁砻鳎云渲械种效果相对较好。病原真菌培养到第,分别稀释叮倍,倍,倍,倍,倍浓度后,对番茄灰霉病菌囊种坡史直鹞%,.ィ%,.ィ甇%,.%,.ィ%,.ィ欢苑衙好咕螅甤抑菌率分别为:.%,.ィ%,%;对小麦赤霉菌菌丝的抑制率分别为:.ィ%,.ィ%,.ィ%;对小麦根腐病菌丑关键词:菌株鉴定发酵条件沈阳农业大学硕士学位论文菌丝的抑菌率分别为:.ィ菌丝的抑制率分别为:.ィ甇%,.ィ%,.ィ%。
/甌/甌.~..%..瓸%,甋..、甌ィ瓸骾甌ィ甌痬,·,%....,甀瓵瑃甌
%,.ィ%,..ィ甇%,.%。...,沈阳农业大学硕士学位论文疘,ィ%,.ィ%,..%:;;甤.
刖昆虫病原线虫共生菌属于肠杆菌科,包括光杆状菌属和致病杆菌属礁鍪簦芯糠⑾郑饬礁鍪舻睦コ娌≡叱娴纳背婊钚院芮浚现代害虫生物防治中已经广泛应用。有许多与其共生的细菌已证明也有较强的杀虫抑菌昆虫病原线虫及共生菌的致病机理:线虫侵入寄主昆虫后,分泌毒性物质,来排斥寄主昆虫的免疫系统,同时将共生菌释放到寄主昆虫体腔内,共生菌生长繁殖并产生毒产生各种酶将寄主昆虫的组织器官破坏并将其分解为营养物质,为线虫的生长繁殖提供营养物质,同时产生的抑菌活性物质能够抑制其它杂菌的生长,为线虫的生长提供良好的环境。共生菌能产生许多有应用潜力的代谢产物,胞内晶体蛋白、色素及荧光素等。共生菌可以产生杀虫毒素,对许多害虫都有较强的致死作用。一类细菌,属肠杆菌科,目前,包括致病杆菌属和发光菌属,它们分别与斯氏线虫属和异小杆线虫属南叱婀采F渲兄虏「、⒐饩龌蚶嘈偷闹郑褐籰、和產。共生菌的研究历史还比较短,因此对于新分离的菌株或种的鉴定是比较困难的。前人已经通过多种分类方法对共生菌的种系进行分析,其种下的分类已取得一定进展,但目前对昆虫病原先虫共生菌的分类地位还存在一定的分歧。随着研究者的工作积累,会有更多菌株的发现,有关共生菌的各项研究数据也会逐渐积累,对共生菌的进化和分类地位也会逐步明确。目前,细菌及共生菌的分类方法主要包括数值分类,化学分类,表观分类,分子分类法,多项分类法,其中,表观分类法是最基础,而且是一直被沿用的分类方法,主要包括形态观察和生理生化特征的测定;分子分类法是上个世纪年代之后,随着生物技术的发展而逐渐形成的较新的分类方法。共生菌发酵条件研究:共生菌的产量多少受营养条件、值大小、温度高低、通气量、甚至发酵时间等多种