文档介绍：姓名 ＊** 系年级 *＊＊*＊**＊* 学号＊*＊***＊*＊＊*
科目 动物生理学实验 同组者 **＊、＊** 日期 *＊＊***＊＊＊*＊
蛙类斯氏离体心脏灌流
【实验目的】
１。 学****斯氏离体蛙心灌流法;
２。 了解心肌的生理特性;
3. 观察Nａ+、K+、Ｃａ2+离子等对离体心脏活动的影响。
【实验原理】
心肌具有自动节律性（ａuｔoｒｈｙthmiｃitｙ)收缩的特性，可以用人工灌流的方法,研究心脏活动的规律及特点;还可以观察灌流液成分的改变对离体心脏活动的影响。
【实验材料】
材料:蟾蜍。
器具:常用手术器械，解剖盘，蛙板（木质)，毁髓针,玻璃分针，手术剪，手术镊，铁钉，蛙心套管，套管夹，双凹夹，滑轮,蛙心夹,支架，双针形露丝刺激电极，滴管,小烧杯，棉线，张力传感器,生理信号采集系统。
试剂：任氏液，5％NaCｌ溶液，１%KＣl溶液，2％CaＣｌ２溶液。
【实验步骤】
1。 暴露动物心脏
取一只蟾蜍,双毁髓后背位置于蛙板上，一手持手术镊提起胸骨后方的皮肤，另一只手持手术剪剪开一个小口,然后将剪刀由开口处伸向皮下,向左、右两侧下颌角方向剪开皮肤。将皮肤掀向头端，再用手术镊提起胸骨后方的腹肌，在腹肌上剪一口,将金冠剪紧贴体壁向前伸入(勿伤及心脏和血管)，并沿皮肤切口方向剪开体壁，剪断左右乌喙骨和锁骨，使创口呈一倒三角
形。一手持眼科镊，提起心包膜,另一手用眼科剪剪开心包膜，暴露心脏．
2. 斯氏蛙心插管
仔细识别心脏周围的大血管。在左主动脉下方穿一线，并打一活结备用。左手提起主动脉上的结扎线,右手用眼科剪在结扎线下方、，然后将成盛有少量（套管内２～3ｃｍ高度）任氏液（内含葡萄糖）的斯氏蛙心套管,由开口处插入动脉圆锥．当套管尖端到达动脉圆锥基部时，应将套管稍稍后退,使尖端向动脉圆锥的背部后下方及心尖方向推进，经主动脉瓣插入心室腔内（于心室收缩时插入,但不可插得过深，以免心室壁堵住套管口)。此时可见血液冲入套管,并使液面随心脏搏动而上下移动,表明操作成功（否则需退回并重新插入）。用滴管吸取套管中的血液，更换新鲜任氏液。稳定住套管后，轻轻提起备用线,将左、右主动脉连同插入的套管用双线紧紧扎紧（不得漏夜)，再将结线固定在套管的小玻璃钩上,，看清静脉窦的位置，于静脉窦下方剪断有牵连的组织，仅保留静脉窦与心脏的联系,使心脏离体。(切勿损伤静脉窦）。用任氏液反复冲洗心室内余血,使套管内灌流液不再有残留血液。保持套管内液面高度一致（1。5～2cm)，即可进行实验。
图1 斯氏蛙心插管法
3。 连接实验装置
将插好离体心脏的套管固定在支架上,用蛙心夹夹住少许心尖部的肌肉（不可夹得过多,以免因夹破心室而漏液）。在将蛙心夹上的系线绕过一个滑轮与张力传感器相连。注意：勿使灌流液滴到传感器上．打开生理信号采集系统,接通张力传感器输入通道。调节系线的拉力,使心脏的收缩活动在显示屏上出现．调节显示器上心脏收缩曲线的幅度适中。调整扫描速度,使心搏曲线的幅度与宽度适中.