文档介绍：天津医科大学
博士学位论文
弱精症精子蛋白质差异表达变化及其在弱精症中可能作用研究
姓名:石理华
申请学位级别:博士
专业:临床医学;外科学(泌尿外)
指导教师:孙光
2012-05
中文摘要研究目的通过采用相对和绝对定量的等量异位标签,咝б合嗌祝V势琢S../椒ū昙恰⒓觳狻⒓ǚ治鼍拥鞍字剩酝蓟竦媒掀渌芯方法更加全面的精子蛋白质生物学信息;通过比较精子蛋白质在正常组以及轻度、中度、重度弱精症组中的动态表达变化,探索精子蛋白质差异表达在弱精子症的作用;分析不同程度弱精子症生殖相关精子蛋白的变化情况,探讨涉及生殖过程蛋白质在弱精症中的变化规律。研究内容和方法用甃狹疢椒ㄑ芯康鞍字时泶锉浠诔扇巳蹙⒅械淖用及其可能机制。收集正常精子以及弱精子症精子治G帷⒅小⒅囟,采用椒ㄐ械鞍妆昙牵旌涎泛笥甃甅疢械鞍字首榧ê筒钜定量分析。蛋白质表达情况所定量的蛋白通过基因和蛋白分类网站行在线蛋白检索,对所定量蛋白进行功能注释和蛋白分类。研究结果本研究收集赡昴行跃罕瓯荆渲小篎常例,轻度弱精症例,中度弱精症例,重度弱精症例,四组患者年龄、禁欲时间以及精子形共鉴定了个蛋白质,显著改变胝W楸缺泶锷系骱拖碌髟诹倍或以上鞍字适课个。包括分子功能相关蛋白、生物过程相关蛋白、细胞成分、蛋白质分类成分以及生物途径蛋白。分子功能蛋白以催化蛋白、结合蛋白和分子结构蛋白为主,生物过程蛋白以代谢过程、细胞过程、免疫反应过程及细胞通讯过程蛋白质为主,细胞成分蛋白质中大部分是细胞内成分,少量胞浆蛋白质。轻度、中度、重度弱精症组显著上调和下调表达改变的蛋白质数量分别天津医科大学学位论文态等无显著差另.—,
关键词:弱精症;精子蛋白质组学;为、和个,、中、重度三组中均呈显著下调和上调表达。在个蛋白质中,涉及生殖珿锕痰蛋白个,在轻、中、重度弱精症组呈现不同的变化规律。研究结论昙悄芎芎玫挠τ糜谌蹙⒕拥鞍字恃芯浚梢曰竦媒更全面的蛋白质差异表达信息。在弱精症中,有数量众多的精子蛋白质表达呈现明显改变,涉及多种分子功能和生物过程。差异表达精子蛋白质在分子功能上主要体现为影响精子的催化、结合和分子结构;在生物过程方面主要体现在代谢过程、细胞过程、免疫反应过程及细胞通讯过程。其表达变化主要以下调表达为主,精子活力的下降可能与相关蛋白质表达降低密切相关。涉及生殖过程蛋白质在不同程度弱精症组呈现不同的变化规律。—/;差异蛋白质天津医科大学博士学位论文
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研究现状、成果男性不育是不孕不育的重要原因之一。资料显示,夫妇患有不育症%是男性不育所致【6谀行圆挥校蹙又⒄加邢嗟贝蟮谋壤H蹙又⒌牧床表现之一为精子活动能力下降。根据曜肌G蠡颊呓~后手淫取精,经连续我陨系木撼9娣治鎏崾揪忧跋蛟硕级小于%或快速直线前向运动的精子小于%,精子密度大于×痬渌问常或基本正常者可诊断为弱精子症。弱精子症有轻度、中度、重度掷嘈停岫热蹙又ⅲ%,但セ騛级精子ィ%;卸热蹙又ⅲ级ィ%或毒%,且级ィ重度弱精子症,指逗虲级精子数量ィ渲衋级精子为零。研究结果表明,弱精症的发生与钙离转运、络氨酸磷酸化、基因、精浆成分异常以及精子蛋白质表达变化密切相关。钙离转运方面,根据作用机制的不同,通道主要可以分为嗉吹缪姑控通道⑹芴迕趴谻ǖ希库控性通道【。等证实在人的精子中存在蠺型的緇亚单位表达,其中·虲定位在鞭毛前段和中段,而利固逡部梢苑⑾·虲存在与精子中。因此,饕T诙跃釉硕姆⑸驮动过程中起关键的调控作用。此外,研究发现主要在精子获能过程中起作用,而则是能够诱发顶体反应的关键,但不是都单独起作用,往往是需要几种类型的通道协同作用才能完成精子生理生化的变化过程。络氨酸磷酸化对精子运动力的维持、精子获能、超激活运动以及顶体反应等生理过程十分重要。精子鞭毛和顶体是精子发生酪氨酸磷酸化的主要部位。蛋白酪氨酸磷酸化首先发生在鞭毛主段,至精子结合到透明带时,才在小鼠精子鞭毛的主段和中段发生,并且只有主段发生酪氨酸磷酸化后中段才能发生磷酸化,主段的磷酸化似乎是中段磷酸化的前提Q芯糠⑾郑珹5鹘诰运动力的支架蛋白,在获能过程中⑸野彼崃姿峄黾佑隤结合的蛋白,使得谔匾煜赴峁怪斜荒技爰せ睿钪仗岣呔柙硕Α等【研究显示敲除小鼠与裘芟喙基因发现其精子鞭毛天津医科大学博士学位论文月舌
鞭打幅度和频率下降,运动力降低。蚨嗵杂肽行匀蹙⑾喙亍S腥说鞑橥钅系厍鹤迦巳例弱精症患者等位基因和基因型频率,发现任换蚱德