文档介绍:艾滋病实验室检测进展
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一、检测进展
1、样本:全血、血清、血浆、唾液、尿液、
滤纸干血斑
2、筛查方法:酶标、快速、化学发光
3、试剂:三代→四代
4、确证方法:WB/RIBA
5、病毒载量:定性、定量
6、CD4:微球法、体积定量法
7、新发感染:BED →亲和力
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HIV抗体检测可用于诊断、血液筛查、监测等 :
以诊断为目的的检测是为了确定个体HIV感染状况,包括临床检测、自愿咨询检测、根据特殊需要进行的体检等。
以血液筛查为目的的检测是为了防止输血传播HIV,包括献血员筛查和原料血浆筛查。
以监测为目的的检测是为了解不同人群HIV感染率及其变化趋势,包括各类高危人群、重点人群和一般人群。
检测目的
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感染机制
吸附 → 进入→ 转录 → 整合 → 基因表达→ 芽生集合→ 芽生→ 成熟
“柏林病人”,世界上第一个被公认治愈的艾滋病病人(2009)
gp120
gp41
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Fiebig 分级
实验室检测指标
感染时间
Ⅰ级
VL 阳性,其他检测阴性
5天以内
Ⅱ级
VL 阳性,P24抗原阳性,其他检测阴性
6-10天
Ⅲ级
抗体阳性,WB阴性
11-13天
Ⅳ级
抗体阳性,WB不能确定
14-19天
Ⅴ级
抗体阳性,WB阳性,WB检测没有P31条带
20-89天
Ⅵ级
抗体阳性,WB阳性,P31条带阳性
>90天
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作为高危人群检测点,pool PCR阳性,p24抗原阳性,但四代ELISA、三代ELISA均阴性,召回时感染21天,三代ELISA阳性,确证试验结果不确定,感染41天检测确证试验阳性。
有一对MSM与网络上找到的一位MSM性伴接触之后约1周,相继出现急性期感冒症状,发烧,肌肉疼痛,乏力。高危行为后2周,到门诊检测。
急性期病例
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第一检测点,仅pool PCR阳性,p24抗原、四代ELISA、三代ELISA均阴性,召回时感染22天,三、四代ELISA阳性,确证试验结果不确定,感染30天时确证试验阳性。
Pool阳性,p24、四代筛查试验结果阴性
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(一)样本
(1)全血、血清、血浆、唾液、尿液以及DBS样品可用于HIV抗体检测。
(2)抗凝全血可用于CD4+和CD8+T淋巴细胞测定。
(3)血浆可用于HIV-1病毒载量、基因型及耐药检测。DBS样品可用于HIV-1基因型及耐药检测。
(4)全血、血浆、淋巴细胞富集液、外周血淋巴细胞(PBMC)及DBS样品可用于HIV核酸的定性检测。
(5) PBMC、全血、淋巴细胞富集液等可用于HIV-1分离培养。
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1、全血样本
采血管选择K2EDTA、K3EDTA抗凝管。
不建议使用肝素抗凝。临床中不使用肝素抗凝进行免疫学检测项目,可能对白细胞计数有影响。
全血用于CD4检测
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最好使血液达到试管的填充线处
确保保持正确的血液:抗凝剂比例
+/- 10% 填充量的差异是可接受的
当血液与EDTA-Na2抗凝剂的比例为1∶4以上时不影响.
防凝血采集注意事项
样本
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