文档介绍：大连医科大学
硕士学位论文
全反式维甲酸对肝癌细胞侵袭转移能力影响的研究
姓名:田波
申请学位级别:硕士
专业:外科学(普外)
指导教师:李冰
.耍全反式维甲酸对肝癌细胞侵袭转移能力影响的研究指导教师:李冰教授硕士研究生:田波胀专业名称:外科学摘要/方法:以含不同浓度玬/%/痩及对照组孵育旌蟮腍—赴匀斯ぶ刈榛啄ぁ!狪徒涸宋制作用,但对其机理的研究尚不多见。本实验通过体外实验和动物实验观察全反式维甲酸穞的完全培养液孵育狥细胞,绘制斓纳で撸鄄能力,观察对狥细胞基底膜组分粘附能力的抑制作用:将不目的:维甲酸类化合物对多种恶性肿瘤的侵袭和转移都有明显的抑,愿蜗赴/瘤株侵袭和转移能力的影响,并初步探讨起作用机理。对孵育旌蟮腍—赴脑鲋骋种谱饔茫徊舛ú煌ǘ鹊连结蛋白,筒阏沉鞍琇的粘附同浓度的孵育斓腍—赴又钟谛∈蟮奈簿猜觯锹天后的肺转移情况,观察对狥细胞血道转移能力的抑制作用;将对数生长期的狥细胞分别接种与小鼠的足垫皮下,给药组以//日/募亮扛锹旌缶植恐琢鲎橹纳で榭
和引流淋巴结转移情况,观察对狥细胞侵袭能力和淋巴结转移能力的抑制作用;免疫组化法检测局部肿瘤组织中狥细胞型谋泶锴榭觯幻鹘好钙追ḿ觳釮—赴跫嘌锨逡汉土组织抽取液中型胶原酶的表达情况,观察对—赴鸌结果:对体外培养的獸细胞的增殖能力和对基底膜组分的粘附能力均有显著的抑制作用,在一定的浓度范围内,随着浓度的递增,其抑制作用也逐渐增强,在痩,—痩,’/ǘ仁保栽鲋衬芰Φ囊种坡史直鹞%,.ィ%,%,.ィ籄訦—赴血道转移的能力有显著的抑制作用,且随浓度的递增而增加,经孵育旌螅琀—%,.ィ籄訦细胞局部侵袭能力和淋巴道转移能力均有显著的抑制作用,在以//日/:免疫组化检测表明,可显著增加局部肿瘤组织内狥细胞阃的型胶原的表达,减轻肿瘤细胞对基底膜组织的破坏,同时对局部瘤组织内的赴腜泶镉邢灾囊种谱饔茫好鹘好钙追ḿ觳獗砻鳎对赴谔迥诤吞逋釯徒涸傅姆置谀芰突钚跃邢著的抑制作用,可使,删及的活性形式的量均有显著胶原和增殖细胞核抗原胶原酶的分泌能力和活性的影响。给药时,。//
结论:对肝癌细胞株狥的局部侵袭能力和血道转移、淋细胞外基质粘附能力的抑制,以及降低型胶原酶的分泌及其活性,巴道转移能力均有显著的抑制作用,且在一定的浓度范围内呈剂量依赖关系。对狥的侵袭和转移能力的抑制作用是多靶点联合作用的结果,其中包括对狥细胞增殖能力的抑制,对狥细胞与保护基底膜完整性等环节。关键词:肝细胞癌白酶维甲酸肿瘤转移肿瘤侵袭金属蛋
慷尬狥/—,,。/琲籱/琣卜,..,
/狥,疭,,,,,,琧.
//瑃痌,耺/一痩,猰/琹疘‘。痩,%,.琣ィ%,.疭,’.ィ甹%。..,琣..
Ⅳ咐狥瑃.,琲篐一,
全反式维甲酸对肝癌细胞侵袭转移能力影响的研究指导教师:李冰教授专业名称:外科学胀硕士研究生:田波活性的化合物,是目前临床上常用的一类抗肿瘤药物。维甲酸类化合入的研究薄=矗谕庋芯糠⑾治姿崂嗷衔锒远嘀侄裥灾琢的侵袭和转移能力有较强的抑制作用ǘ云渥饔没淼难芯可胁多见,其作用靶点不甚明了。本实验通过体外实验和动物实验观察全反式维甲酸穞,愿蜗赴└咦R屏鲋闔/虺细胞侵袭和转移能力的影响,并初步探讨其作用机理。前言维甲酸类化合物是一大类天然的或合成的具有维生素慕峁购物在恶性肿瘤的分化诱导和化学预防方面的作用及其机理已有了较深
材料与方法近交系∈螅胀ḿ叮坌裕—芰洌逯耍杀校病理教研室动物室繁育提供;小鼠腹水型肝细胞癌高转移瘤株#简称狥杀拘2±斫萄惺医ㄖ瓴⒍炒妫籖獻靶牛血清为静罚籄徒涸癋猄公司;单克隆抗体购自深圳晶美生物技术公司。无菌条件下抽取腹水,合吹次。将肿瘤细胞加入完全培养基サ男∨QG培养小时以除去巨噬细胞,吸取悬浮液,离心收获肿瘤细胞。将赴髡J实钡呐ǘ确制颗嘌对数生长期的狥细胞鲆圆煌┪锱ǘ鹊耆/琲籱/痌孔瓶。分别于培养的第、天用台盼蓝染色排除法计数活瘤细胞数,绘制生长曲线,计算对体外培养斓腍细胞的增殖抑制率。~、材料司产品;兔抗鼠型胶原抗体及约梁泄鹤员本┲猩缴锕こ坦二、方法⑾赴嘌液氮冻存的赴焖俳舛常又钟小鼠的腹腔,旌訦细胞体外增殖能力的影响。养基培养。分为椋哉兆楹筒煌ǘ華母┳—定期换液。%增殖抑制率给药组活细胞数对照组活细胞数