文档介绍：叶绿体色素的提取、分叶绿体色素的提取、分离和理化性质离和理化性质 1实验目的实验目的实验目的: 实验目的: 1 1、学****叶绿体色素的提取方法。、学****叶绿体色素的提取方法。 2 2、了解叶绿素和类胡萝卜素的一些主、了解叶绿素和类胡萝卜素的一些主要理化性质。要理化性质。绿色植物的光合作用是在叶绿体中进行的,其中绿色植物的光合作用是在叶绿体中进行的,其中吸收光能的是叶绿体色素。了解叶绿体色素的组成、吸收光能的是叶绿体色素。了解叶绿体色素的组成、性质对于理解光合作用的本质很有帮助性质对于理解光合作用的本质很有帮助。 2 植物色素包括: 植物色素包括: ①①脂溶性的叶绿体色素: 脂溶性的叶绿体色素: 存在于叶绿体,与光合作用存在于叶绿体,与光合作用有关,如叶绿素、类胡萝卜素等有关,如叶绿素、类胡萝卜素等②②水溶性的细胞液色素: 水溶性的细胞液色素: 存在于液泡中,与花朵的颜存在于液泡中,与花朵的颜色有关,如花青素属黄***类物质。色有关,如花青素属黄***类物质。 3一、实验材料: 一、实验材料: 菠菜叶片菠菜叶片 4二、原理与操作步骤二、原理与操作步骤(一)叶绿体色素的提取原理(一)叶绿体色素的提取原理各种植物叶绿体中所含的色素有数十种。各种植物叶绿体中所含的色素有数十种。叶绿素类、叶绿素类、类胡萝卜素类类胡萝卜素类和藻胆素(藻类)。和藻胆素(藻类)。分三大类分三大类存在于类囊体膜上 5 叶绿体中含有叶绿体中含有绿色素绿色素(包括叶绿素(包括叶绿素 a a和叶绿素和叶绿素 b b,属于,属于酯类化合物)和酯类化合物)和黄色素黄色素(包括胡萝卜素(烃类)叶黄素(包括胡萝卜素(烃类)叶黄素(衍生的醇类))两大类。它们与类囊体膜上的(衍生的醇类))两大类。它们与类囊体膜上的蛋白质相蛋白质相结合结合,而成为,而成为色素蛋白复合体色素蛋白复合体。。不溶于水,而溶于有机溶剂。不溶于水,而溶于有机溶剂。故可用乙醇或***等有机溶故可用乙醇或***等有机溶剂提取。剂提取。 6提取的作步骤: 提取的作步骤: ( (1 1 )取菠菜叶片洗净、擦干、剪碎、混匀, )取菠菜叶片洗净、擦干、剪碎、混匀, ,放入研钵中。,放入研钵中。( (2 2)加入少量石英砂及碳酸钙粉(目的?), )加入少量石英砂及碳酸钙粉(目的?), 加加2 2~ ~3 3 滴管滴管 95% 95% 乙醇,研磨至糊状乙醇,研磨至糊状; ;( (3 3 )再加)再加 15ml 15ml 95% 95% 乙醇,提取约乙醇,提取约 3 min 3 min ,过滤于三角瓶,过滤于三角瓶中中; ;( (4 4 )残渣用)残渣用 5-10ml 5-10ml 95% 95% 乙醇冲洗,一同过滤乙醇冲洗,一同过滤于三角瓶中。于三角瓶中。 7 水研磨匀浆(光破坏对照): 水研磨匀浆(光破坏对照): 取取2g 2g 剪碎的新鲜叶片,放入少量石英砂(不剪碎的新鲜叶片,放入少量石英砂(不加碳酸钙粉),用水研磨。加碳酸钙粉),用水研磨。先加先加 2ml 2ml 蒸馏水,研至糊状,再加蒸馏水蒸馏水,研至糊状,再加蒸馏水 20ml 20ml , , 搅均,不过滤。搅均,不过滤。 8 1. ( 叶绿素( a a, ,b b)的化学性质很不稳定,容)的化学性质很不稳定,容易受强光的破坏,特别是当叶绿素与蛋白质分易受强光的破坏,特别是当叶绿素与蛋白质分离以后(有机溶剂提取液),破坏更快,而类离以后(有机溶剂提取液),破坏更快,而类胡萝卜素则较稳定。胡萝卜素则较稳定。(提取出叶绿素后先做这一步) (提取出叶绿素后先做这一步) 用 15N研究燕麦叶片中色素的合成和分解发现,在植物体内, 72 小时全部更新一遍。(二)叶绿体色素的理化性质(二)叶绿体色素的理化性质 9 光对叶绿素的破坏操作步骤: 光对叶绿素的破坏操作步骤: 有太阳光时按照指导书的测定方法操作有太阳光时按照指导书的测定方法操作稀释时不用严格定量? 稀释时不用严格定量? 稀释稀释 1-2 1-2 倍,为什么要稀释? 倍,为什么要稀释? 太阳光下太阳光下:水、乙醇:水、乙醇暗处(实验台):水、乙醇暗处(实验台):水、乙醇两组(四管) 10