文档介绍:《细胞工程》复****参考
第一章绪论
1、 细胞工程的定义及分类。
定义:以细胞为基本单位,在体外条件下进行培养、繁殖,或人为地使细胞 的某些生物学特性按人的意愿发生改变从而达到改良生物品种或创造新品种,加 速繁育动植物个体,或获得某种有用的物质的过程。
分类:根据生物类型的不同分为动物细胞工程、植物细胞工程和微生物细胞 工程。
2、 请简单谈谈植物细胞工程在在育种、食品工业等方面的应用。
在植物育种上的应用:将植物常规育种技术和植物组织培养技术相结合,可 以获得常规技术难以获得或无法获得的种质材料,缩短育种周期,提高育种效率。 其优势有快速获得特殊倍性材料,克服远缘杂交不亲和,克服杂种胚早期夭折, 导入外源基因,种质资源保存,种苗脱病毒与快速繁殖。
在食品工业中的应用:有不受地理、气候、季节条件的影响,节约土地、减 低成本、提高经济效益,容易获得诱变突变体等优点。但许多技术还停留在实验 室阶段,生产规模待扩大。应用有利用植物细胞工程生产香料、调料、食品添加 剂、天然食品等。
第二章细胞培养的设备和操作技术
1、细胞培养的营养成分主要包括哪些?各有什么功能作用?
细胞培养的营养成分包括无机盐、有机化合物和生长调节剂。
无机盐:一是组成各种化合物,成为结构物质;二是构成一些特殊的生理活 性物质,参与植物的代谢活动;三是这些元素之间互相协调,以维持离子浓度平
衡、胶体稳定、电荷平衡等生物电化学方面的作用;四是在发育过程中影响组织 器官的建成。
有机物质:(1)糖:维持培养基合适的渗透压,为细胞提供合成新物质的碳 骨架,为细胞呼吸代谢提供底物和能量。
维生素:利于细胞代谢和器官分化。
氨基酸:组成蛋白质及其他代谢功能。
肌醇:促进糖类的相互转化,维生素、激素的利用作用,是培养物快 速生长。
(5 )腺噤吟、硫酸盐的激素:促进芽、根的形成和生长。
(6)附加物:为非细胞生长所必需,但对细胞生长有利。琼脂:使培养基 在常温下凝固,不参与代谢。活性炭:利用其吸附能力,减少一些有害物质的影 响。
(7 )其它有益有机添加物或未知复合成分:提供一些必要的微量营养成分、 生理活性物质和生长激素等。
生长调节剂:培养基中对培养物影响最大最显著的就是激素,激素的种类、 浓度以及配比都会显著的影响愈伤组织的形成,不定根、不定芽的分化,胚状体 的形成等。主要有生长素、细胞分裂素、赤霉素和脱落酸4类。(1)生长素:诱 导愈伤组织的形成、胚状体的产生以及试管苗的生根,更重要的是配合一定比例 的细胞分裂素诱导腋芽及不定芽的产生。(2)细胞分裂素:促进细胞的分裂和器 官的分化、延缓组织的衰老、增强蛋白质的合成、抑制顶端优势、促进侧芽的生 长及显著改变其他的激素作用。(3)赤霉素:能打破休眠,促进果实成长,能刺 激不定胚发育成正常小植株,但在培养基中很少添加,因为它的作用往往是负面
的o(4)脱落酸:阻碍发育、促进老化、形成休眠芽、抑制生长使继代培养时间 延长。
2、 细胞工程在实验室设计上有何要求?
满足实验准备(培养基配制,洗涤与灭菌\无菌操作和控制培养三个基本 要求。
3、 植物组培中消毒、灭菌有何作用和意义,具体方法包括哪些?
植物组培中,凡用于培养和无菌操作的房间、器具、培养瓶、培养基,培养 材料和操作者的衣物都应随时进行灭菌,以确保不受杂菌污染,否则,由于杂菌 的生长繁殖速度一般都比培养的组织快得多,最终将把组织全部杀死,这些污染 微生物还可能排泄对植物组织有毒的代谢废物,因此在培养容器内部保持一个完 全无菌的环境是绝对必须的。
消毒灭菌的具体方法包括物理方法和化学方法。物理方法包括高温高压灭菌、烘 烤或灼烧灭菌、射线处理、超声波等灭菌方法,过滤、离心沉淀等除菌方法。化 学方法即使用灭菌剂,如熏蒸灭菌、消毒液灭菌(70%酒精、升***、苯酚、漂白 精、新洁尔灭、次***酸钠、过氧化氢*
第三章愈伤组织培养
1、定义:脱分化,人工种子,愈伤组织,细胞的全能性
脱分化:已分化好的细胞在人工诱导条件下恢复分生能力,恢复到分化状态 的过程。
人工种子:指将植物离体培养产生的体细胞胚包埋在含有营养成分和保护功 能的物质中,在适宜条件下能发芽出苗的颗粒体。
愈伤组织:在离体培养过程中形成的具有分生能力的一团不规则细胞,多在 外植体切面上产生。
细胞的全能性:每个细胞都具有发育成完整个体的潜在能力,因为每个细胞 都具有全套的遗传基因,不论是性细胞还是体细胞在特定条件下可以进行表达。
2、 植物组织培养的主要意义有哪些?
植物组织培养的主要意义:加速无性繁殖;获取脱毒苗;扩大变异范围;加 速亲本材料的纯化;种质资源的试管保存;为基因工程的全面实施人工控制遗传 方向打下基础。
3、 如何降低或防