文档介绍：重组猪瘟病毒赴砦辉现硐感〔《狙铆啦一‘粒亚单位疫苗研究一学位娩,文一论文提交日躲。%年学扭授予单位:ū迸┮荡笱凋内图书分类号:范京惹一:。专业名称:预防兽医学学位授予日期:。。答辩委员会主席:导师姓名:李一经教授申请学位级别:农学博士答辩日期:年耹‘所在单位。衮北农业大学教授国际图书分类号年一密级。/.,Ⅳ’·;。一。‘’
摘要将用酶促合成方法获得的的基因,,,属于细小病毒科⑾感〔《。、胚胎死亡、胎儿畸形、胎儿木乃伊化及不孕等。猪瘟琀则是由猪瘟病毒引起的一种高度接触性、热性传染病,是危害养猪业的主要传染病之一。猪瘟除了可以引起败血症之外,还可引起一系列其它临床表现,如妊娠母骆流产、胎儿畸形、淋巴细胞和血小板减少等免疫系统受损、继发或并发细菌或其他病毒感染等。而且各种年龄的猪均易感,给养猪业带来巨大的经济损失。因此,研制和开发具有良好的免疫保护作用的预防性和治疗性疫苗来接种健康猪群和感染者具有重要的现实意义。本研究以的优势赴砦籈含特异的辅助性和细胞毒性赴表位;。訮的核衣壳蛋白蛭VЪ茉靥宸肿樱囱兄圃し乐砦梁椭硐小病毒病的病毒样颗粒疫苗的新思路,在国内外尚未见有类似报道。首先,对分离的局闘,在细胞上进行增殖,根据ǜ娴牟考毒株虻暮塑账嵝蛄校肙和等软件,设计合成一对引物,以腄为模板,应用┰龀龀ぴ肌叮的蚱危ǜ没蚱慰寺到靥澹⒔辛嗣盖小鉴定和序列测定,并将测序结果与ǜ的其他毒株基因进行序列比较,发现与其他毒株的核苷酸同源性均在%以上,推导的氨基酸同源性均在%以上,说明闢基因的保守性很高。将从中酶切纯化后的蚩寺≈琳婧吮泶镌靥錺的涞亩嗫寺∥坏闵希狿甐。酶切和ń峁砻鳎竦昧薖蛴雙质粒的阳性重组子。根据缺ǖ赖腃赴砦籈幕蛐蛄校杓埔欢砸铮股舷掠引物之间重叠个碱基,并对酶促合成方式进行改良。采用普通的福┰龌竦昧舜小约为多肽基因片段。上游,并命名为—,测定结果表明,#⒂。重组杆状病毒肿拥腜鉴定表明,获得了杆状病毒一虻闹刈樽樱狿.】代病毒。将经过三次噬斑筛选纯化后的病毒接种赴辖性鲋常琍鉴定后完全纯化的病毒,命名为代病毒。并按同样方法制各高效价的代病毒,以备用于表达。将高效价的代重组杆状病毒接种于形成%单层的赴天后收获病变细胞,应用郾0纺旱缬甈庖哂〖産和免疫酶斑点技珻或蚄
东北农业大学农学博士学位论文术蟹治觯范ㄋ泶锏牡鞍追肿恿看笮≡嘉揖哂刑烊坏鞍椎抗原特异性。应用免疫电镜对表达产物进行观察,可见到许多病毒样的颗粒,表明目的基因在杆状病毒表达系统中得到了表达,且表达的蛋白能自我钱配成假病毒粒子,同时证明在的瞬迦隒匾斓腡细胞表位后,并不影响其装配。将带有外源重组基因的阳性重组杆状病毒在昆虫细胞薪写罅勘泶后,在无佐剂参与的情况下,按确定的免疫程序免疫芰涞腂痗小鼠,检测小鼠的细胞免疫和体液免疫学指标。结果表明,表达蛋白所形成的假病毒粒子,不仅能诱导小鼠机体产生抗的特异性从Γ鼓艽碳ば∈蟛筆的特异性中和抗体。关键词猪瘟病毒:赴砦豢乖褐硐感〔《荆籚基因;亚单位疫苗;免疫
Ⅱ咂▲.,%.,.,籺,..痜甌.,...—猻甐甌
,:.,二瓻琱甧.../琲—.篎:篊篹;;籭..甈瓵..籘;
猪细小病毒病流行及免疫预防研究进展姆⑸芳霸谖夜牧餍星榭猪瘟与猪细小病毒感染是危害我国养猪业发展的两种重要病毒性传染病。猪细小病毒是引起猪繁殖障碍的主要因素之一,可使母猪发生流产,不孕,产死胎,木乃伊胎等。各种不同类型的猪均可感染。猪瘟是由猪瘟病毒引起的一种高度接触性传染病,该病传染可分为急性、亚急性、慢性、典型和非典型的疾病过程,是世界粮农组织和各国政府严密监控和检疫的主要传染病之一。这两种疾病广泛存在于世界各养猪国家,给这些国家带来巨大的经济损失。因此,自这两种疾病的病原被确认以来,各国兽医工作者一直致力于其防制的研究,并取得了很大进展。本文将对近年来这两种疾病的流行病学、病原学、以及疫苗预防等方面的研究进展作一简要回顾。.猪细小病毒,是引起母猪繁殖障碍主要病原体之一龋。猪感染细小病毒,主要表现是母猪在怀孕前期易受感染,经胎盘使胚胎或胎儿受到侵袭,引起褥猪发生流产、胚胎死亡、胎儿畸形、胎儿术乃伊化及不孕等,各种不同类型的猪包括:家猪、野猪、仔猪、后备猪、育肥猪以及猪均可感染ǔ嘶吃心钢硗猓渌嘈偷闹砀腥竞缶廾飨缘牧俅仓⒆础4送釶还与非化脓性心肌炎、皮炎、肠炎及病毒血症等有关笳鸬龋籐琍能增强猪圆环病毒引起的断奶仔猪多系统消瘦综合征,猪细小病毒病最早发生在欧洲一些国家。猪细小病毒是年和在进行猪瘟