文档介绍：小组成员: 小组成员: 1实验题目土壤中微生物的检测和分离纯化主讲: 2实验目的?。?,并用此技术进行微生物稀释分离、划线分离接种。?。?,体会无菌操作的重要性。 3实验原理?土壤中有数量巨大、种类丰富的微生物,可以从中分离、纯化得到许多有价值的菌株。从混杂的微生物群体中获得只含有某一种或某一株微生物的过程称为微生物的分离与纯化。常用的是平板分离法。?平板菌落计数法是将待测样品经适当稀释,使其中的微生物充分分散成单个细胞,取一定量的稀释样液接种到平板上,经过培养,由每个单细胞生长繁殖而形成肉眼可见的菌落,即一个单菌落应代表原样品中的一个单细胞。统计菌落数,根据其稀释倍数和取样接种量即可换算出样品含菌数 4实验意义 5试验材料?土样 10g ,牛肉膏蛋白胨培养平板 20个,未知菌种平板,当天降雪; ?平皿,涂棒,接种环,无菌 200ul, 1000ul 吸头,记号笔,酒精灯,取液器:1000ul 、 200ul 各一支,培养箱; ?% 无菌生理盐水, 250ml 三角瓶中装 99ml 生理盐水,每瓶加约 20粒玻璃珠, 250ml 三角瓶中 99ml 生理盐水,作100 倍稀释用。 6实验步骤?:取牛肉膏 5g,蛋白胨 10g ,NaCl5g ,蒸馏水1000ml 配置培养基,调 ,灭菌。于讲课前倒板 20块。?:选择肥沃土壤,去表层土,挖5~20cm 深度的土壤数 10g, 装入烧杯,带回实验室;取校河水装入烧杯, 带回实验室;取新积雪中间层转入烧瓶,带回实验室。?:称取土样 ,放入盛 99ml 无菌水并带有玻璃珠的三角瓶中,用手振荡 5min 使土壤均匀分散成为土壤悬液( 10-2 )。用 200ul 的无菌吸头从中吸取 土壤悬液,注入事先分装有 无菌水的试管中,吹吸 3 次,摇匀( 10-3 )。类推制得 10-4 、10-5 的土壤悬液。?: ?:用报纸包好倒置 35℃培养箱里培养 24小时。?:对土壤稀释液平板进行计数,单菌落划线平板分离单菌落,其他平板观察微生物种类、数量。所有平板都要照相。 7实验预期得到结果及目的 a bcf e d i h g图 24h 结果。 a、b、c,稀释 10-3 倍, 1-3号; d、e、f,稀释 10-4 倍, 1-3号; g、h、i,稀释 10-5 倍, 1-3号。 89 10