文档介绍：会计学
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酶联免疫吸附试验双抗体夹心法
实验三
（一）免疫标记技术
1、酶联免疫吸附试验（双抗体夹心法）
2、斑点免疫层析试验
（二）免疫细胞的分离与纯化
（含淋巴细胞）
（三）免疫细胞功能测定
1、E玫瑰花环试验（示教）
2、淋巴细胞转化试验（示教）
（四）结核病相关的免疫试验简介
（一）1、酶联免疫吸附试验（ELISA）
待检标本阳性对照阴性对照
“ELISA双抗体夹心法”，第5步，加待检标本、阳性对照、阴性对照各2孔，每孔100ul，37℃，30分钟：
（一）免疫标记技术
【概念或原理】：利用荧光素、酶、胶体金、发光物质以及放射性核素等易显示物（标记物）连接于已知抗体或抗原，再去检测待测标本中的相应抗原或抗体的量或其存在与否。
【分类】
荧光免疫技术
酶免疫技术→ELISA（双抗体夹心法）
放射免疫技术
金免疫技术→斑点免疫层析试验
化学发光免疫技术等
Ag
＋ Ab
荧光素
Ag
－Ab－荧光素
＋ Ab
荧光素
（？）
＋ Ab－荧光素
（洗涤）
免疫标记技术举例：
（细胞表面可见荧光）
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cells with fluorescence
tubercle bacillus with fluorescence
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酶免疫技术
酶免疫组化技术：组织或细胞中抗原定位
酶免疫测定(如ELISA)：测液体标本中抗原或抗体
ELISA (酶联免疫吸附试验，enzyme-linked immunosorbent assay)
sandwich ELISA to detect Ag √
indirect ELISA to detect Ab
competitive ELISA to detect Ab or Ag
1）已知抗体包被
2）洗板
3）加待检抗原标本
4）洗板
5）加酶标记抗体
6）洗板
7）加底物显色，测定
(measure color)
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（显色）（不显色）
（定量）
( no Ag )
( Ag )
polystyrene
Sandwich ELISA (to detect Ag, 双抗体夹心法，原理)
（封闭的意义）