文档介绍：HCCB00167发酵产物的研究~发酵、分离、结构燕定辩攀睾1魏麟攀:爰爨章5壤戎杰量戈瓣羹(1沈阳药耕太学沈阳110016 2上海米旒照物药物研震中心上海201203) 蒸要t鬻耩耋HIV-1攘合簿器裁裁楱鍪簿遥嚣嚣毪毯戆遮皇蓥蓥拣--HCCB00167,篡毒HIV-I 整合酶撺裁赉j活健,本文主要针对箕辩势产耪遴褥了分离。方潦慕臻乙酸乙蘸攀戢、硅胶襞层析和黼效液相制备掷分离手段,遇过对其质谱和核撇共振等图谱数据的分析,瓣嫩了其化学结构。缱暴熬蓥撩发辩滚挚分离三个他会耪,分别婺裳辫麦煮釜醇<1)、过氡弛麦角糕酵<II)、毒一了鏊一媲建一窆一羧羧(疆≥。蒸谂键舍餐(壤≥蓄浚蘸囊空蒸蔼孛发瑗。关键涮lHIVI整合酶抑制剂模型敷子寝HIV墓絷艇秘孛嚣粪翼蠢懿绽凄羹菸酶≤遴转豢蓦凌蛋巍麟》鼗蓦发奎窕熬攀一菱囊蘸效熊被快速出蕊酌耐菊性所限裁。1995年,美籍率鬻祷大一教授楚爨了磊蓠l随寒土常雳静“璃尾酒群法”,联合应用黼囱酶抑制剂和逆转录酶抑制剂进行治疗,从而娥缓耐药性产嫩。人们希望寻我撵鬻予HIV21生嚣属羯孛荚链鞣燕麴抗AIDS魏躲,扶覆在“漓尾漤疗法”中添魍一耪具寄豢翡麓稳茭畿这戮灌强篷台潘疗熬效暴。透年慕黧研究发嚣艮整含繇装试鸯是囊瓣合莲静撬 AIDS黼物作用的靶点f11。近年来,对撼含酶及其抑制窬IJ的研究已成为~个热点。檬物内生菌是一个多样性十分事鬻,能产生具谢多种生物活性的次级代谢产物的微生物类婺。耧耀I-IIV-I鏊畚酶簿簧蓑壤燮,豢建塞产皇辍鞴l整含蘸瓣裁裁鋈曩嚣蕊耪粪生蓥一 HCCB00167。B00167的发酵产褥静磷究,葳英黧稠审分离出三个张合携,势别为溅缃甾醇(I)、过氧化麦角甾酩(II)、4一丁撼一吡啶一2一羧酸(Ⅲ)。薹。耱鞲辩验用膜分离靛鬻融上海亚东械黻树脂有限公落生产;LABOROTA4000旋转蒸发便, 疆∞C}∽H公司生产;核磁共振测趱仪为Varian--Inova--400型梭磁共振仪测愆;质谱仪为 MAT212磁袁囊誊魏;攫褥茬麦主辫灏兴毽王参:器誉骚公逮生产; GF254硅胶铝薄槭怒MERCK(GERMANY)公镧产最;屡褥矮疆胶鸯孛蓬瓣螽迸发薤蓑开发谢臌公司生产;所用试剂均为中网医药(集团)上海化学试剂徐闭生产,规格为分析纯。 HCCB00t67菌株激上海来盏堑燃耩魏研究牙发巾心豫藏。辫予培养薹≤嚣≥:篱莓藉董,蠢米糖{,豆豁2,KHzPO,,蝌粪熬。襄酵黯弊萋≤鏊≥; 蔗糖1,小麦淀粉l,溅米粉l,面粉l,黄豆粉l,, HCCB00167菌株发酵采用二级,首先将冻予管中静霖始菌株接蚕PDA培莽基平投上活化,,于28"C培养5d,接种于种子培养基,28"C,220r/min旋转描床上振荡培养48h,转接予发酵培养基,500r/rain,28℃连续振荡培养5天。 ,离心收集菌丝体。菌丝体用***没泡,减压蒸去***,用乙酸乙酯萃取,减压浓缩至浆状物;上清液调pH至中性后用纳滤膜浓缩,然后用乙黢乙酯萃取,减援浓缩至浆状物;合并浓缩液。翱看***溶解,拌硅荻(100--200基),减压蒸予,主硅胶柱分离,熙磊淮醚一嚣醺二元系统梯度洗聪(毙铡必40:l,10:l,5:l,2:l≥, 分部收集,以TLC(展