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抗体检测知识点抗体检测方法.doc

上传人:guoxiachuanyue002 2021/9/30 文件大小:29 KB

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抗体检测知识点抗体检测方法.doc

文档介绍

文档介绍:: .
抗体检测知识点——抗体检测方法
(一)中和反应
中和反应不仅测定抗体是否存在, 而且测定抗体是否具有免疫保护作用, 因而,
尽管这种方法复杂费时,影响因素众多而且不稳定,在预防医学领域特别是病毒性 疾病中,仍然是不可取代的抗体检测方法。
中和试验的基本方法是,将待检物质与活的致病微生物混合,感染实验动物或 敏感的细胞,然后观察实验动物是否发病、死亡,或细胞是否发生病变。
早期中和实验主要利用疾病的动物模型进行,目前,在病毒性疾病领域,通常 利用培养病毒的细胞进行。在结果的解释中应当注意,细胞的中和试验通常只反应 抗体阻断病毒进入细胞的能力,这只是病毒致病过程中的一小部分。
(二) 沉淀反应
血清蛋白质、细胞裂解液或组织浸液等可溶性抗原与相应抗体结合出现沉淀物,
这类反应称为沉淀反应。该类反应可检测到 20〜2mg / ml水平的抗体。较常用的
检测方法有:
1. 单向免疫扩散
将一定量已知抗原混于琼脂中制成琼脂板,在适当位置打孔后将抗体加入孔中 扩散,抗原抗体在扩散过程中形成以抗体孔为中心的沉淀环,可用于检测血清中的 IgG、IgM、IgA 和补体 C3等的含量。
2. 双向免疫扩散
将抗原与抗体分别加于琼脂凝胶中,二者自由向四周扩散,在相遇处形成沉淀 线。可用于抗体的定性、定量检测。
(三) 凝集反应
细菌、红细胞等颗粒性抗原与相应抗体结合后形成凝集团块,这一类反应称为 凝集反应,该类反应可检测到 1 ug/ml 。
1 •直接凝集
将细菌或红细胞与相应的抗体直接反应,出现细菌或红细胞凝集现象。检测方 法有两种:一是玻片凝集试验,用于定性测抗原,多用于快速诊断;二是试管凝集 试验,在试管种系列稀释待检血清,加入已知颗粒抗原(死菌或活菌,多用死菌), 进行的血清反应,用于定量检测抗体。温箱中放 24小时后取出反应管在室温放 2
个小时再判断为宜,判定凝集滴度以凝集程度为 ++而定。
2 •间接凝集
将可溶性抗原包被在红细胞或乳胶颗粒表明,与相应抗体反应出现颗粒凝集的 现象。如用丫球蛋白包被的乳胶颗粒, 检测病人血清中的一种抗 丫球蛋白的抗体(类 风湿因子)。
(四) 补体参加的反应
利用抗体与红细胞上的抗原结合, 激活反应体系中的补体, 导致红细胞的溶解,
用溶血现象作为指示系统帮助结果判定。常用的方法有补体结合试验和溶血空斑试 验。
(五) 用标记抗原进行的抗原抗体反应