文档介绍：豆芽中蛋白质含量的测定——考马斯亮蓝 G-25 0 染色法生科 201 2级 3班童雪晨 201250606 8 一、前言蛋白质在细胞和生物体的生命活动过程中,起着十分重要的作用。生物的结构和性状都与蛋白质有关。蛋白质还参与基因表达的调节, 以及细胞中氧化还原、电子传递、神经传递乃至学****和记忆等多种生命活动过程。在细胞和生物体内各种生物化学反应中起催化作用的酶主要也是蛋白质。许多重要的激素, 如胰岛素和胸腺激素等也都是蛋白质。因此,测定蛋白质含量具有重要意义。二、材料与方法 1 、材料绿豆芽、黄豆芽 2 、方法 1) 采用考马斯亮蓝 G-250 染色法测定蛋白质含量, 按下表(一) 所示取 7 支试管, 依次加入各溶液, 反应后立即摇匀, 置室温下放置 5 分钟,然后测各管的 OD 值,以 OD 值为纵坐标,浓度值为横坐标绘制标准曲线。 2) 称取绿豆芽、黄豆芽下胚轴各 1g, 放入研钵中, 加少量石英砂和 2ml 水, 研成匀浆, 转入离心管, 再用水分三次冲洗研钵(每次 4ml ) , 均转入同一离心管。等重后 3500r/min, 离心 15min, 取上清液转入 25ml 容量瓶,用水定容(样品提取液)。 3)取样品提取液于试管中, 加入考马斯亮蓝 G-250 染色液 5ml ,充分混匀,放置 5 分钟,测 OD 值,记录结果,查曲线,得蛋白质浓度( μ g/ml )。三、结果分析表(一)制作标准曲线加样表表(二)标准曲线经计算得,黄豆芽中蛋白质浓度 X 黄= (μ g/ml ) 绿豆芽中蛋白质浓度 X 绿= (μ g/ml ) 编号 123456黄豆芽绿豆芽标准蛋白(ml) 水( ml) 0 浓度( mg/ml) XX 染色液( ml)55555555 则,根据公式样品蛋白质含量( μ g/g ) =[X × 提取液的总体积]/ 样品鲜重( g) 得黄豆芽中蛋白质含量= μ g/g 绿豆芽中蛋