免疫细胞分离与功能检测.ppt

文档介绍：免疫细胞分离与功能检测
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目的要求
掌握：Ficoll-hypaque分层液分离PBMC的原理、方法，淋巴细胞亚群分离的原理、方法及应用，T细胞增殖试验的方法，B细胞的数量及功能的检测；
熟悉：T细胞功能的体内试验，T细胞介导的细胞毒检测的方法；
了解：淋巴细胞的纯化与亚群分离的方法、吞噬细胞的分离方法、溶血空斑试验。
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第一节 免疫细胞的分离
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免疫细胞的分离及检测
※检测：各类免疫细胞及其亚群的数量和功能测定
※方法：体外法为主
※目的：判断机体免疫状态
※意义：探讨疾病的发病机制、发展、预后、疗效
免疫细胞的分离 是指将各种参与免疫反应的
细胞从血液或组织中分离出来
*
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免疫细胞的起源与分化
红细胞 血小板 肥大细胞 中性粒细胞 巨噬细胞 树突状细胞 浆细胞 T细胞 NK细胞
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免疫细胞种类
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免疫细胞的分离流程
外周血
PBMC
纯淋巴细胞
T、B细胞
TC亚群/BC亚群
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PBMC包括：淋巴细胞、单核细胞
各种血细胞比重不同,利用密度梯度离心进行分离
常用分层液：ficoll－hypaque，percoll
一、 外周血单个核细胞的分离和纯化
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细胞
比重
血小板
~
PBMC
~
多核白细胞

红细胞

外周血各细胞成分的密度
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Ficoll分离液法是一种单次差速密度梯度离心的分离法，主要用于分离外周血中的单个核细胞。
Ficoll分层液：±
离心：密度梯度离心
分离：各类细胞按其相应密度重新分布
一、Ficoll分离法
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