文档介绍：分子生物学课件
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基因操作(gene manipulation)
基因工程(gene engineering)
遗传工程
gene cloning
molecular cloning
基因操作的核心部分为重组DNA技术。
Recombination DNA technology
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基因工程与建筑工程
生物反应器
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DNA Recombination
1 定义： 对目的基因进行体外重组，再将重组分子导入受体细胞，使这个基因在受体细胞中复制、转录、翻译表达的过程。
克隆（clone）：n,无性繁殖系及其后代。基因完全相同;
v,指从同一祖先产生这类同一的DNA分子群或细胞群的过程。
（Gene, cell,个体）
20世纪70年代发展起来的遗传学的一个分支学科。
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理论上三大发现：
Avery肺炎双球菌转化实验：
证实了遗传物质的本质是 DNA（1944年）
Watson 和Crick：
提出DNA双螺旋结构模型（1953年）
Nirenberg等：
确定了遗传信息的传递方向（1961-1966年）
DNA RNA 蛋白质
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技术上三大发明：
工具酶：分子手术刀，切割与缝合基因，包括限制性内切核酸酶、连接酶、DNA聚合酶、RNA聚合酶等，对DNA或RNA进行各种各样的修饰。
载体(vector, vehicle)：本意是媒介体，在基因工程上指能将目的基因导入宿主细胞的DNA分子。
逆转录酶（reverse transcription,RT)：打破了中心法则，使真核基因制备成为可能，RT-PCR。
RNA DNA
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gene manipulation 过 程
1、目的基因的获取（PCR,gene library)；
2、载体(vector)的选择与构建(工具酶等）；
3、目的基因与载体连接，构建重组DNA分子；
4、重组DNA导入受体细胞，转化子筛选；
5、受体细胞中目的基因的功能表达。
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基因工程的基本过程
分(合成)、 切、连、转、选、鉴
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重组DNA技术的意义
打破了自然种的界限
真核/原核生物间基因的交流
对生物进行定向改造
基因治疗（基因矫正/添加，RNAi）
基因工程药物（生长激素，细胞生长因子，重组疫苗等）
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组织纤溶酶原激活物（tissue plasminogen activator，tPA）
One example---
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