文档介绍:实验四肌糖原的酵解作用解读
实验四肌糖原的酵解作用解读
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实验四肌糖原的酵解作用解读
生化实验报告
山东大学实验报告
2011年 3月 30 日
姓名 张行润 系年级 2009 级生科 4 班 学号 200900140177 同组者 于潜
科目 生物化学实验 题目 肌糖原的酵解作用 仪器编号 105
一、 实验目的
学习检定糖酵解作用的原理和方法
了解糖酵解作用在糖代谢过程中的地位及生理意义
二、 实验原理
在动物、植物、微生物等许多生物机体内,糖的无氧分解几乎都按完全相同的过程进行,
本实验以动物肌肉组织中肌糖元的酵解过程为例。 肌糖元的酵解作用, 即肌糖元在缺氧的条件
下,经过一系列的酶促反应最后转变成乳酸的过程。 肌肉组织中的肌糖元首先与磷酸化合而分
解,经过己糖磷酸脂、丙糖磷酸脂、丙酮酸等一系列中间产物,最后生成乳酸。该过程可综合
在下列反应式:
1/n (C6H5O5) n+H2O→2CH3CHOHCOOH
糖原 乳酸
肌糖元的酵解作用是糖类供给组织能量的一种方式。 当机体突然需要大量的能量, 而又供氧不足(如剧烈运动时) ,则糖元的酵解作用暂时满足能量消耗的需要。在有氧条件下,组织
内糖元的酵解作用受到抑制,而有氧氧化则为糖代谢的主要途径。
糖元酵解作用的实验, 一般使用肌肉糜或肌肉提取液。 在用肌肉糜时, 必须在无氧的条件下进行;而肌肉提取液,则可在有氧条件下进行。因为,催化酵解作用的酶系统全部存在于肌
肉提取液中,而催化呼吸作用(即三羧酸循环)的酶系统,则集中在线粒体中,糖元可用淀粉代替。
淀粉存在于绿色植物的多种组织中(种子、块茎、干果) 。
糖元是动物和细菌细胞内糖及其所反应的能源的一种储存形式, 其作用与淀粉在植物中的作用一样,故有“动物淀粉”之称。
糖元或淀粉的酵解作用, 可由乳酸的生成来观察, 在除去蛋白质与糖以后, 乳酸可以与硫酸共热变成乙醛,后者再与对羟基联苯反应产生紫红色物质,根据颜色的显现而加以鉴定。
该法比较灵敏, 每毫升溶液含 1- 5μg乳酸即产生明显的颜色反应, 若有大量糖类和蛋白质等杂质存在,则严重干扰测定结果,因此,实验中应尽量除净这些物质。另外,测定时所用的仪器应严格地洗涤干净。
实验中所用到的化学反应方程式如下:
糖原→ ( 糖原磷酸化酶 ) → 1- 磷酸 - 葡萄糖→ 6- 磷酸葡萄糖,进入糖酵解。
1/n(C6H10O5)n+H2O2CH3CHOHCOOH
乳酸的鉴定(灵敏度 1~5 微克 / 毫升)
浓H2SO 4
O
CH 2CHCOOH
CH 3CH + HCOOH
OH
O
HO
HO
+CHCH
H
3C
C H
+ H O
3
2
HO
紫红色
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