文档介绍：·814· 安徽医科大学学报 Acta Universitatis Medicinalis Anhui 2021 May；56（5）
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◇技术与方法◇
大鼠乳鼠颌下腺成纤维细胞的分离培养及鉴定
周正炜，郭派派，王曼曼，孙寒飞，王 珍，邰 宇，刘 琪，张巧琳，吴华勋，汪庆童，魏 伟
摘要 探讨大鼠乳鼠颌下腺成纤维细胞体外分离及培养的 研究提供实验保障。然而目前尚没有成熟的原代唾
方法。采用 ％胰酶多次消化法收集新生 SD 大鼠乳鼠 液腺成纤维细胞的分离培养方法，使相关细胞学研
颌下腺成纤维细胞。高内涵细胞成像法检测细胞增殖能力， 究的开展颇为困难。该课题组通过胰酶消化法成功
免疫荧光、Western blot 和 RT-PCR 法检测波形蛋白表达水 的从新生大鼠颌下腺中分离得到形态良好、纯度较
平，CD90 标记成纤维细胞、鉴定细胞纯度。最新消化分离得
高的成纤维细胞，并摸索出适合的培养条件，为进一
到的细胞呈亮球形，轮廓清晰，单个散在或聚集成团分布，90
步从细胞分子水平开展 SS 研究提供实验手段。
min 后即有大量细胞贴壁，其中部分细胞已开始伸展。5 ～6
d 可形成单层细胞，传代后的细胞呈长纺锤形或多边形。波 1 材料与方法
形蛋白表达呈强阳性。传代 3 代的细胞培养体系中成纤维
细胞约占 87％。含 5％FBS 的 DMEM／F12 培养基培养 24 h 实验动物 清洁级新生 48 h 内的 SD 乳鼠 4
即可检测到细胞的大量增殖。胰酶消化法是获得大鼠乳鼠 只，体质量 5 ～6 g，雌雄不限，由安徽医科大学动物
颌下腺成纤维细胞的有效方法。 实验中心提供，许可证号：SCXK（皖）2017-001。本
关键词 大鼠乳鼠；颌下腺成纤维细胞；原代培养；胰酶消化 实验方案已通过安徽医科大学临床药理研究所动物
法；波形蛋白 伦理委员会批准。
中图分类号 R 主要实验试剂及仪器 DMEM／F12 1 ∶1 培养
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