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5×蛋白上样缓冲液(含巯基还原剂)使用说明.doc

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5×蛋白上样缓冲液(含巯基还原剂)使用说明.doc

文档介绍

文档介绍:Solarbio"
LIFE SCIENCES

5 X蛋白上样缓冲液(含巯基还原剂)使用说明
货号:P1041
规格:10ml
保存:-20 C保存,自发货之日起至少 3个月有效。
产品简介:
5X蛋白上样缓冲液(含巯基还原剂)适用于 SDS-PAGE(SD变性聚丙烯酰***凝胶电泳)时作
蛋白质上样用。其主要成份为 SDS巯基还原剂,溴酚蓝,缓冲盐溶液等。
SDS可与蛋白质结合使蛋白质一SDS复合物上带有大量的负电荷,这时蛋白质本身的电荷完 全被SDS掩盖,消除了各种蛋白质本身电荷的差异, SDS还可以断开分子内和分子间的氢键,
破坏蛋白质分子的二级和三级结构, 巯基还原剂可以断开半胱氨酸残基之间的二硫键, 破坏
蛋白质的四级结构,消除了蛋白结构之间的差异。 最终无电荷及结构上差异的蛋白 (亚单位),
电泳速度只是与其分子量大小有关。 溴酚蓝用作电泳时的指示剂, 可大概指示电泳结束的时
间。
使用说明:
请按每40 yL蛋白样品加入10 yL上样缓冲液的比例(5 倍稀释)来使用。如果蛋白浓 度过高,可用双蒸水稀释。
混匀后, 100 C水浴加爆5分钟,使蛋白变性。
冷却到室温后, 10000-14000离心、2-5分钟,取上清直接上样电泳即可。
注意事项:
聚丙烯酰***凝胶浓度为 8%时溴酚蓝指示条带的位置大概在
30kd左右,胶浓度12%时,
约在20kd左右,胶浓度15%寸,大概在10kd。请根据自己目标条带来判断结果电泳时间。
本试剂因含巯基还原剂, 有一定的毒性,为了您的安全和健康, 请穿实验服并戴一次性
Solarbio
LIFE SCIENCES

手套操作。
蛋白上样缓冲液含有溴酚蓝指示剂, 值受保存温度影响,在低温冻存状态下,溶液
可能会呈现深棕色,不影响产品使用。
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