文档介绍:实验六血凝和血凝抑制试验
一、试验目
掌握血凝和血凝抑制试验 原理和操作方法, 能够正确判定试验结果并对结果进行分析。
二、血凝试验( HEMAGGLUTINATION, HA)
血凝现象: 有些病毒可凝集一些动物(如鸡、鹅、豚鼠、绵羊)和人 红细胞(RBC)
原理: 血凝素与RBC表面对应受体结合, 引发RBC凝集, 用以测定病毒 含量
HA试验 原理示意图
用途: ①确定病毒 含量;
②计算病毒 血凝价, 为血凝抑制试验做准备
血凝价: 能使血球产生50%凝集 病毒最高稀释度
血凝单位
试验材料
鸡新城疫病毒
鸡红细胞: 采集健康鸡血液, 以阿氏液抗凝, 用生理盐水洗涤3-5次, 将血浆、白细胞等充足洗去, 用生理盐水配成1%红细胞悬液备用
%生理盐水
96孔U型微量反应板、微量移液器、灭菌塑料吸头
操作步骤
在血凝板第一排 1-12孔加入50UL生理盐水。
在第1孔中加入50UL病毒, 混匀后吸50UL到第2孔, 如此倍比稀释直到第10孔, 混匀后弃50UL; 最终两孔(11、12)为红细胞对照。
将1% 红细胞轻轻摇动混匀, 在1-12孔中每孔加入50UL。
手工震荡, 37℃静置30MIN (室温40分钟 )后观察结果
结果判定
血凝价 A:26 B:25 C:22 D:27
A
B
C
D
以50% 红细胞发生凝集 病毒悬液 最高稀释度作为该病毒液 红细胞凝聚效价, 即一个血凝单位。
血凝价:
1:256