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HIV抗体检测原理和方法课件.ppt

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HIV抗体检测原理和方法课件.ppt

上传人:读书百遍 2021/11/28 文件大小:1.60 MB

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HIV抗体检测原理和方法课件.ppt

文档介绍

文档介绍:HIV抗体检测原理和方法
HIV感染 试验室检测
常见HIV病原学检测方法:
病毒分离
抗原检测
核酸检测( cDNA测定-PCR、 RNA测定-病毒载量)
其她方法: 逆转录酶测定、原位杂交
常见HIV抗体检测方法:
ELISA
快速HIV检测
免疫印记法 ( Western Blot)
其她方法: 免疫荧光法(IFA)、放射免疫沉淀试验
抗原检测 目
(一)检测早期感染, 缩短窗 口期 (可提前1-2周)
HIV-P24抗原阳性仅作为HIV
感染窗口期 辅助诊疗依据,
不能据此确诊
(二)新生儿 感染
婴幼儿HIV抗体阳性不能用于诊疗感染HIV
婴幼儿体内从母亲得到 HIV抗体连续存在时间最长不超出18个月。
在18月龄以前能够用多个不一样 非抗体依靠性 检验方法对新生儿HIV感染进行辅助诊疗, 包含: HIV P24抗原检测、病毒分离培养、RNA或DNA测定。
18月龄以前婴幼儿感染HIV诊疗要结合临床表现和试验室综合诊疗。
抗体检测 目
输血和移植安全(为了接收者 安全)
监测(为了知晓人群流行情况)
临床HIV疾病 诊疗 (为了知晓个体感染情况)
为了达成以上 某个目 HIV 检测可能不适合其她目 , 比如输血服务 检测不适合临床诊疗HIV感染
HIV抗体检测
HIV抗体检测分为筛查试验(包含初筛和复 检)和确定试验(WB)。
(一)检测试剂
筛查试剂必需是经国家食品药品监督管理局注册同意、批检合格、临床评定质量优良、在使用期内 试剂。现在常见 筛查试剂有酶联免疫、颗粒凝集和其它快速诊疗试剂。采供血机构进行血液筛查应采取HIV-1/2混合型酶联免疫试剂。自采自供血 单位必需进行HIV抗体检测。
(二)筛查方法
1. 常见 筛查方法是酶联免疫试验(ELISA)现在中国外关键使用第三代(双抗原夹心法)试剂, 少数使用第二代试剂。血源筛查仍以第三代ELISA为主, 国际上有些国家和地域已将线性免疫酶测定(第四代ELISA试剂)用于血源筛查。第四代ELISA试剂是最近发展起来 HIV抗原抗体联合测定试剂, 可同时检测P24抗原和抗HIV-1/2抗体。与第三代抗HIV-1/2试剂相比, 检出时间提前了4-。其优点在于能同时检测抗原抗体, 降低血源筛查 残余危险度。
酶联免疫吸附试验 Enzyme linked immunosorbent assay
ELISA 原理
ELISA 基础是抗原或抗体 固相化及抗体或抗原 酶标识。结合在固相载体表面 抗原或抗体仍保持其免疫学活性, 酶标识 抗原或抗体既保留其免疫学活性, 又保留酶 活性 。在测定时, 受检标本(测定其中 抗体或抗原)与固相载体表面 抗原或抗体起反应。
ELISA 原理
用洗涤 方法使固相载体上形成 抗原抗体复合物与液体中 其她物质分开。再加入酶标识 抗原或抗体, 也经过反应而结合在固相载体上。此时固相上 酶量与标本中受检物质 量呈一定 百分比。
ELISA 原理
加入酶反应 底物后, 底物被酶催化成为有色产物, 产物 量与标本中受检物质 量直接相关, 故可依据呈色 深浅进行定性或定量分析。因为酶 催化效率很高, 间接地放大了免疫反应 结果, 使测定方法达成很高 敏感度。