文档介绍：增液润燥汤对干燥综合征模型鼠IL-23表达的影响
摘要:目的研究增液润燥汤对SS模型鼠颌下腺IL-23的影响,探究本方治疗SS的机制。方法 60只BALb/c小鼠,随机法均分为:正常组,模型组,本方低、中、高组,西药组;免疫诱导法制备SS模型;ELISA法检测IL-23水平。结果模型组IL-23比正常组显著升高;各治疗组IL-23比模型组降低,差别均有统计学意义(P<)。结论本方能降低SS模型鼠颌下腺IL-23水平,通过降低IL-23水平,抑制病灶炎症反应,减轻唾液分泌腺损伤。
关键词:SS;增液润燥汤;颌下腺; IL-23
干燥综合征(Sjögren's syndrome, SS)是一种主要侵犯唾液腺等外分泌腺的自身免疫性疾病,严重影响着人民的生活质量和身心健康。文献研究表明,IL-23在SS发生发展过程中起重要作用,故选用IL-23作为检测指标初步探究增液润燥汤治疗SS的作用机制。
一、材料及设备
:SPF级BALb/c雌性小鼠60只,体重18-20g,购自河南省实验动物中心,许可证号:SCXK(豫)2010-0002。
:增液润燥汤:北沙参15g、天冬15g、炙紫菀10g、知母10g、乌梅10g、桔梗15g、桃仁10g、制附子6g、炙甘草6g,购于河南中医学院第一附属医院门诊颗粒药房(四川新绿色药业有限公司);白芍总苷胶囊,宁波立华制药有限公司,国药准字H200550058;百白破疫苗,武汉生物制品研究所有限责任公司,国药准字S19980016。
:5722分光光度计:北京普析新通用仪器有限责任公司,型号:TU-1901;冷冻离心机:美国Kendro实验室产品公司。
二、方法及步骤
1. 制备抗原溶液:取同种鼠颌下腺, 剔除淋巴结,切碎,加入RIPA裂解液 、PMSF,充分匀浆,10000-14000g转速、4℃条件下匀速离心5min,取上清液,以考马斯亮蓝比色法测定抗原含量。用灭菌PBS将上清液稀释成800ug/mL,加等量
CFA,得到400ug/mL的抗原溶液。
:第0、14天,。在第2、7天,,加强免疫。以颌下腺病理炎性浸润为检测指标。
:60只BALb/c小鼠,随机法平均分组如下:
正常组:去离子水;
模型组:去离子水;
增液润燥汤低剂量组(ZYRZI):;
增液润燥汤中剂量组(ZYRZII):;
增液润燥汤高剂量组(ZYRZIII):;
白芍组(BSZG):。
注:灌胃体积:/(10g·日·只);免疫当天开始给药,直至第60天,第61天摘眼球放血法处死小鼠,进行相关处理。
4. IL-23测定:无菌操作台上取两侧颌下腺,称重并记录,冰浴中电动匀浆约1min,4℃、3000rpm下离心20min,取上清液,按照ELISA试剂盒说明书进行检测,以标准物浓度为横坐标,OD值为纵坐标得标准曲线,计算实际样品浓度。
,计量资料均采用(±S)表示,所得数据均符合正态分布及方差齐性检验,组间多重比较采用单因素方差分析