文档介绍：化学发光和荧光免疫技术和仪器
第一节 化学发光免疫分析技术
第二节 电化学发光免疫分析
第三节 时间分辨荧光免疫分析法
第四节 荧光偏振免疫分析法
第五节 化学发光免疫分析 临床应用
内容概述:
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教学目标和要求
掌握化学发光免疫分析技术 基础原理、反应 底物和标识方法以及反应类型。
熟悉电化学发光免疫分析 基础原理和标识物, 时间分辨荧光免疫分析法 基础原理及其标识物和螯合物。
了解荧光偏振免疫分析法 基础原理和技术特点, 化学发光免疫分析 临床应用
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第一节 化学发光免疫分析技术
基础原理
反应 底物
标识方法
反应类型
相关仪器
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一、基础原理
化学发光, 是指伴随化学反应过程所产生 发光 发射现象。一些物质在进行化学反应时, 吸收了反应过程中所产生 化学能, 使反应物分子形成电子激发态, 当电子从激发态返回到稳定 基态时, 多出 能量就以光子 形式发射出来。这一现象称为化学发光。
A + B C* + D, C* C + h
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(一)产生化学发光反应 条件和过程
化学发光与荧光 区分:
化学能 光能
化学发光反应 条件 :
反应必需提供足够 激发能焓变(△H)介于170～300 kj·mol-1 之间, 才能在可见光范围观察到化学发光现象
吸收了化学能后处于激发态 分子或原子, 必需以光子形式将能量释放出来, 或者将能量转移到另一个物质 分子上并使该分子激发, 当被激发 分子回到基态时, 也以光子 形式释放能量
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(二)化学发光效率
化学发光反应 发光效率(φCl)又称为化学发光总能量 产生率
φCl取决于生成激发态产物分子 化学激发效率
(φCE) 和激发态产物分子 发射效率(φEM)。
通常化学发光反应, φCl值约为10-6
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(三)强度与反应物质浓度之间 关系
反应物 浓度
反应速度
化学发光反应所发出 光 强度
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(四)化学发光 反应类型
直接化学发光 间接化学发光
1．直接化学发光
化学反应释放 化学能激发 是反应产物分子
A + B C* + D, C* C + h
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2．间接化学发光(敏化 化学发光 )
在化学反应中, 激发能传输到另一个未参与化学反应 分子上, 使该分子达成电子激发态, 再由激发态分子返回到基态时发光; 或反应首先生成一个高能量 中间体, 此中间体再将能量转移给另一个未参与化学反应 分子, 使该分子达成电子激发态, 再由激发态分子跃迁回到基态时发光 过程。
A + B C* + D , C* + F F* + E, F* F + h
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