文档介绍：微生物活菌计数方法
微生物计数方法种类
直接计数法
核酸计数法
活菌计数法（培养法）
MPN（Most-Probable-Number ）最大可能数法
混菌法
平板技术法
直接计数法
1. 显微镜直接计数
比浊法
3. 电子计数器计数法
1. 显微镜直接计数
显微计数法适适用于多种含单细胞菌体纯培养悬浮液
血球计数板: 菌体较大酵母菌或霉菌孢子
细菌计数板: 通常细菌
用途: 快速了解发酵液菌数。常见于生产线上生产过程控制。
缺点: 不易区分颗粒、死菌体和杂菌, 计数与真实菌数有很大差异。不能作为正规计数方法。
2. 比浊法
依据菌悬液透光量间接地测定细菌数量。细菌悬浮液浓度在一定范围内与透光度成反比, 与光密度成正比, 所以, 可用光电比色计测定菌液, 用光密度(OD值)表示样品菌液浓度。依据浊度计算出细菌数量。该方法通常能够估量出细菌数量级。常常见于部分特殊微生物快速计数, 如光合细菌和藻类测数。不过因为该方法仅能估测菌数, 不能正确定量, 而且因为部分颗粒和添加剂作用, 不能正确反应该样品质量, 所以在质检过程中不予采取。
3. 电子计数器计数法
工作原理是测定小孔中液体电阻改变, 小孔仅能经过一个细胞, 当一个细胞经过这个小孔时, 电阻显著增加, 形成一个脉冲, 自动统计在电子统计装置上。该法测定结果较正确, 但它只识别颗粒大小, 而不能区分是否为细菌。所以, 要求菌悬液中不含任何碎片。不适于微生物肥料产品检测。
核酸计数法
每一个生物都有一套自己独有遗传物质, 脱氧核糖核酸和核糖核酸, 即DNA和RNA。伴随核酸分析技术发展, 已经能够利用遗传物质对生物进行定性和定量测定, 而且更为灵敏、快速、专一性强。
常见方法: 荧光定量PCR
此法操作精细繁琐, 药品昂贵, 而且常常受到死菌体干扰。临时不能成为微生物肥料活菌计数常见方法,
活菌计数法（培养法）
MPN（Most-Probable-Number ）最大可能数法（关键用于光合细菌和（粪）大肠菌群测定）
混菌法（适适用于兼性厌氧微生物测定）
, 将冷却至50℃左右15~20mL培养基倒入培养皿内轻轻混匀, 培养计数。（食品中乳酸菌总菌数测定）
平板计数法（最常见方法）
平板计数法
使不可见微生物在人工培养基平板上生长成为可见菌落（CFU）, 从而可用肉眼进行观察、计数。较其她方法直观正确 , 是一个经典检测活菌数方法, 也是现在国际上通用方法。
制备一定体积菌悬液, 作一系列倍数稀释, 然后将定量稀释液进行平板培养, 依据培养出菌落数, 计算出样品中活菌数。
平板计数法示意图