文档介绍：血红蛋白的提取和分离讲义
蛋白质分离原理:
依据蛋白质多种特征差异, 如分子形状和大小、所带电荷性质和多少、溶解度、吸附性质和对其她分子亲和力等等, 能够用来分离不一样种类蛋白质。
一、基础知识
（一） 凝胶色谱法
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大多数凝胶是由多糖类化合物（如葡聚糖或琼脂糖）组成多孔小球体, 内部有很多贯穿通道。
依据被分离物质蛋白质相对分子质量大小, 利用含有网状结构凝胶, 来进行分离。
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（分配色谱法）
①相对分子量较小蛋白质轻易进入凝胶内部通道, 旅程较长, 移动速度较慢;
②相对分子量较大蛋白质无法进入凝胶内部通道, 只能在凝胶外部移动, 旅程较短, 移动速度较快。
相对分子质量不一样蛋白质分子所以得以分离。
进行体外试验时, 怎样确保蛋白质不会发生变性呢？
（二）缓冲溶液
能够抵制外界酸和碱对溶液PH值影响,
维持PH基础不变。
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通常由1－2 种缓冲剂溶解于水
中配制而成。调整缓冲剂使用百分比就能够制得在不一样PH范围内使用缓冲液。
3. 在本课题中使用缓冲液是:磷酸缓冲液,
成份: 磷酸二氢钠与磷酸氢二钠
怎样证实凝胶色谱法取得蛋白质是目蛋白？
（三） 电泳:
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带电粒子在电场作用下发生迁移过程。
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①很多关键生物大分子, 如多肽、
核酸等都含有可解离基团, 在一定PH下, 这些基团会带上正电或负电。
②在电场作用下, 这些带电分子会向着与其所带电荷相反电极移动。
③电泳利用了待分离样品中多种分子带电性质差异以及分子本身大小, 形状不一样, 使带电分子产生不一样迁移速度, 从而实现样品中多种分子分离。
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琼脂糖凝胶电泳、聚丙烯酰***凝胶电泳。