文档介绍：受体拮抗剂 pA2 的测定摘要目的: 学习蟾蜍腹直肌的实验方法; 观察筒箭毒碱的骨骼肌松效应;测定乙酰胆碱拮抗剂筒箭毒碱的 pA2 值。方法:制作蛙腹直肌实验标本,分别测量乙酰胆碱引起腹直肌收缩的量效曲线,以及加入筒箭毒碱后乙酰胆碱引起腹直肌收缩的量效曲线,根据两个量效曲线得到 EC50 (引起 50% 效应的药物浓度),代入公式 pA2=pAx+log ( x-1 )( pAx 为筒箭毒碱浓度, x前、后 EC50 )。结果: 乙酰胆碱拮抗剂筒箭毒碱 pA2= 。结论: 筒箭毒碱有明显的骨骼肌松效应,其 pA2 值为。关键词筒箭毒碱; pA2 测定。前言前从药效学中以了解到,拮抗药是具有较强亲和力而无内在活性的药物,靠占据激动药的受体结合位点抑制激动药的兴奋效应从而发挥效应, 为加深对拮抗药的药理效应的实际理解,故打算以乙酰胆碱受体拮抗药筒箭毒碱为例,观察拮抗剂的药理效应。在药效学中, 比较不同药物对同一受体的拮抗效应时, 需要用到 pA2 , 其含义为当激动药与拮抗药合用时, 若2 倍浓度激动药所产生的效应恰好等于未加入拮抗药时激动药引起的效应, 则所加入的拮抗药的摩尔浓度的负对数为 pA2 。 pA2 之越大,拮抗效应越强。于是以筒箭毒碱为例,学习测定 pA2 的方法。材料与方法实验对象:蟾蜍实验器材: 乙酰胆碱, 筒箭毒碱, 任氏液, 氧气瓶, 器官浴槽, 压力传感器, 100ul 注射器,蛙板等常用实验器材。实验方法:(1 )连接生物信号采集分析系统- 肌张力传感器装置。(2 )去健康蛙一只, 减去颅脑, 捣毁脊髓, 使蛙全身松弛, 去皮找到蛙腹直肌, 取一长宽的蛙腹直肌,两头系线制成腹直肌标本。(3 )将已制好的标本固定在器官浴槽中,用任氏液润洗,定容至 10ml , 插入氧气管, 维持蛙腹直肌的活性。给予蛙腹直肌 1g 的前负荷, 待传感器记录的信号稳定后开始给药。(3 )用微量加样器分别吸取 10ˉ 4mol/L 、 10ˉ 3mol/L 、 10ˉ 2mol/ L 的乙酰胆碱各 10ul 、 20ul 、 70ul 共9 个药量,依次向器官浴槽加入 9 个药量,记录肌肉的张力变化。第 9 次记录后,除去溶液,换入新的任氏液 10ml ,等待张力曲线稳定后继续实验。(4) 加入 10ˉ 3mol/L 的筒箭毒碱, 重复步骤(3), 记录 9 次