文档介绍：动物细胞融合与单克隆抗体
【学习目标】
列表比较动物细胞融合与植物体细胞杂交的异同。
理解和掌握动物细胞融合的原理、过程和意义。
理解和掌握单克隆抗体制备的过程的步骤和应用。
【自主学习】
预习任务
(一) 动物细胞融合(又叫:细胞杂交):
概念: 。
杂交细胞:  
动物细胞融合原理:
诱导动物细胞融合的方法:
物理方法:
化学方法:
生物方法:
※灭活:

※灭活病毒诱导细胞融合的原理:

【注意】动物细胞的融合与植物细胞相同,也需要把多个两种细胞放在一起,让它们随机融合后,再从中筛选杂交细胞。
(二)植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较:
比较项目
细胞融合的原理
细胞融合的方法
诱导手段
用途
培养基区别
植物体细胞杂交
动物细胞融合
【思考】植物体细胞杂交技术与动物细胞融合技术有什么不同?
提示:植物细胞与动物细胞结构的不同。
(三)单克隆抗体
:
采用的方法:

这种方法的缺陷是:                                                       
: 动物在免疫反应过程中,体内产生的            种类可多达百万种以上,但是                  。因此,要想获得大量的            ,必须                    ,形成          。遗憾的是,在体外培养条件下,一个                             。解决这一问题的方法是                        。
3. 单克隆抗体 
(1)概念:由单个B淋巴细胞进行无性生殖形成的细胞所产生的化学性质单一、特异性强的抗体。
(2)选取的细胞:
B淋巴细胞的特点:________________,缺点:__________________
骨髓瘤细胞的特点:_________________________        ________。
(3)单克隆抗体的制备:
第一步:将注射到小鼠体内进行免疫;
第二步:从该小鼠脾脏中获得能够产生抗体的细胞,与小鼠的
细胞用或聚乙二醇的诱导下融合;
【思考】为什么选用小鼠的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合?
             (细胞的同源性越接近,融合形成的杂种细胞越易成活)
             此时,培养液中会有哪几种细胞?
(5种,单个的B淋巴细胞、单个的骨髓瘤细胞、融合的B淋巴细胞、融合的骨髓瘤细胞、融合的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞)
第三步:在特定的培养基中,筛选出细胞;
原因:在选择培养基上,未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡,只有      才能生长
第四步:培养杂交瘤细胞,从中挑选出的细胞群,继续培养;
第五步:将该杂交瘤细胞在体外条件下大规模培养或注射到小鼠内增殖,然后再分离纯化单克隆抗体;
提取单克隆抗体:从培养液或小鼠腹水中提取。
(4)特点:
杂交瘤细胞具备双亲的遗传物质,不仅能产生____________,还能__________。
(5)单克隆抗体的应用
①作为诊断试剂